多重置换扩增（MDA）结合多重PCR-Y染色体微缺失检测方法的探究

发布时间：2021-02-09 11:10

　　目的：第一部分：通过对男性原发不育患者Y染色体微缺失的分析研究,探讨Y染色体微缺失的临床意义,为临床进行男性不育的诊断、治疗以及辅助生殖技术提供相应的理论依据。第二部分：回顾性分析Y染色体微缺失患者行ICSI-ET治疗的胚胎受精率、卵裂率、优胚率、妊娠率及早期流产率等指标,初步探讨Y染色体微缺失是否影响ICSI治疗结局。第三部分：通过多重置换扩增（MDA）联合聚合酶链式反应（PCR）建立单细胞AZF检测方法,为临床Y染色体微缺失患者植入前胚胎行AZF检测提供新的方法,为患者合理选择移植胚胎和更确切的遗传学咨询提供依据。方法：第一部分：以2012年1月～2012年10月于天津市中心妇产科医院生殖中心就诊的男性原发无精子症、严重少弱精子症和少精子症患者122例为研究对象。所有患者均按照世界卫生组织（WHO）推荐的方法和诊断标准加以确诊,排除内分泌失调及输精管阻塞等因素。留取上述患者外周血2mL,乙二胺四乙酸盐（EDTA）抗凝,标本在检测前置-20℃冰箱保存。选取30例已正常生育的健康男性为对照。采用盐析法提取DNA,选取15个位点进行Y染色体微缺失检测,包括AZFa区的sY82、sY84、... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
縮略语
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、男性不育患者外周血Y染色体微缺失的检测
    1.1 对象和方法
        1.1.1 实验对象
        1.1.2 实验设备
        1.1.3 实验试剂
        1.1.4 外周血DNA的提取
        1.1.5 Y染色体微缺失检测
        1.1.6 激素测定
        1.1.7 统计学方法
    1.2 实验结果
        1.2.1 DNA提取的质量
        1.2.2 男性不育患者基础临床资料及性激素的比较
        1.2.3 Y染色体微缺失结果
    1.3 讨论
    1.4 小结
二、Y染色体微缺失患者体外受精胚胎情况及临床结局
    2.1 对象和方法
        2.1.1 研究对象
        2.1.2 方法
    2.2 结果
        2.2.1 A组和B组间患者基本情况和临床治疗指标的比较
        2.2.2 各缺失类型间的胚胎情况
    2.3 讨论
    2.4 小结
三、MDA-PCR-AZF检测方法的建立
    3.1 对象和方法
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 实验设备
        3.1.3 实验试剂
        3.1.4 实验方法
        3.1.5 单个细胞的裂解
        3.1.6 多重置换扩增
        3.1.7 性别鉴定
        3.1.8 AZF检测
    3.2 结果
    3.3 讨论
    3.4 小结
全文结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
附录
综述
    综述参考文献
致谢



本文编号：3025543