动力相关蛋白-1在缺氧/复氧诱导人肾小管上皮细胞焦亡机制中的作用
发布时间:2021-02-11 06:38
目的观察人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤时线粒体动力相关蛋白1(dynamin-related protein 1,Drp1)、Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor family pyrin domain containing 3,Nlrp3)以及炎性因子的表达改变和细胞焦亡情况,探讨Drp1在H/R诱导肾小管上皮细胞焦亡中的作用。方法 HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12液培养于37℃、5%CO2和95%O2的恒温培养箱。将细胞分为正常对照组、H/R组、H/R+Drp1抑制剂(H/R+Mdivi-1)组、H/R+si Nlrp3腺病毒(H/R+si Nlrp3)组、H/R+空腺病毒(H/R+Scra)组。检测细胞培养液上清乳酸脱氢酶LDH活性,Western blot检测Drp1、Nlrp3、凋亡相关蛋白-1(caspase-1)、IL-1β表达,2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)检...
【文章来源】:第三军医大学学报. 2016,38(11)北大核心
【文章页数】:6 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 主要试剂
1.2 细胞培养
1.3 实验分组和缺氧/复氧细胞模型的制备
1.4 细胞转染
1.5 细胞焦亡的检测
1.6 DCFH-DA检测细胞活性氧水平
1.7 蛋白质免疫印迹分析
1.8 统计学分析
2 结果
2.1 缺氧/复氧时HK-2细胞发生焦亡
2.2 缺氧/复氧时HK-2细胞Drp1、Nlrp3、活性氧的表达
2.3 Drp1抑制剂Mdivi-1减轻细胞活性氧、Nlrp3表达以及缺氧/复氧诱导的HK-2细胞焦亡
2.4 si Nlrp3能减少Nlrp3的表达和炎症反应以及HK-2细胞焦亡
3 讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]P2X7/NALP3在急性肾小管坏死肾组织中的表达及意义[J]. 曹雪娇,侯卫平,张媛媛,袁发焕. 第三军医大学学报. 2014(06)
本文编号:3028693
【文章来源】:第三军医大学学报. 2016,38(11)北大核心
【文章页数】:6 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 主要试剂
1.2 细胞培养
1.3 实验分组和缺氧/复氧细胞模型的制备
1.4 细胞转染
1.5 细胞焦亡的检测
1.6 DCFH-DA检测细胞活性氧水平
1.7 蛋白质免疫印迹分析
1.8 统计学分析
2 结果
2.1 缺氧/复氧时HK-2细胞发生焦亡
2.2 缺氧/复氧时HK-2细胞Drp1、Nlrp3、活性氧的表达
2.3 Drp1抑制剂Mdivi-1减轻细胞活性氧、Nlrp3表达以及缺氧/复氧诱导的HK-2细胞焦亡
2.4 si Nlrp3能减少Nlrp3的表达和炎症反应以及HK-2细胞焦亡
3 讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]P2X7/NALP3在急性肾小管坏死肾组织中的表达及意义[J]. 曹雪娇,侯卫平,张媛媛,袁发焕. 第三军医大学学报. 2014(06)
本文编号:3028693
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