PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在白蛋白超负荷所致肾小管上皮细胞损伤中的作用

发布时间：2021-02-12 19:26

　　目的:蛋白尿不仅仅是肾小球疾病肾损伤的结果,更是加重肾小管-间质损伤的一种重要原因。前期研究已证实自噬激活减轻了尿蛋白诱导的肾小管上皮细胞损伤,然而自噬激活减轻尿蛋白所致肾小管上皮细胞损伤而发挥保护作用的具体机制尚未完全清楚。近年来线粒体功能异常已成为研究肾小管上皮细胞损伤的热点问题。适时地清除功能异常的线粒体,对于维持肾小管上皮细胞正常生长与代谢具有非常重要的意义。Pink1/Parkin介导的线粒体自噬便是清除线粒体的经典途径之一。由此我们推测尿蛋白所诱导的肾小管上皮细胞损伤是否是通过受损的线粒体激活了Pink1/Parkin介导的线粒体自噬,清除了受损的线粒体,从而减轻了尿蛋白超负荷所致肾小管上皮细胞损伤的呢。本研究通过选取尿蛋白的主要成分白蛋白超负荷处理肾小管上皮细胞,并结合基因沉默技术敲除PARK2基因,检测肾小管上皮细胞凋亡水平、细胞内线粒体功能、自噬水平以及线粒体自噬强度的变化,研究尿蛋白的主要成分白蛋白诱导的肾小管上皮细胞线粒体受损是否通过Pink1/Parkin信号通路介导了肾小管上皮细胞线粒体自噬激活。方法:（1）研究对象:人近端肾小管上皮细胞株HK-2细胞（2）模... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
1.对象和方法
    1.1 肾小管上皮细胞培养及分组
    1.2 总蛋白提取和总蛋白浓度测定
    1.3 Western blot蛋白免疫印迹技术
    1.4 免疫荧光染色技术
    1.5 透射电子显微镜
    1.6 JC-1线粒体膜电位检测
    1.7 Mito-Tracker Green线粒体绿色荧光探针和Lyso-Tracker Red溶酶体红色荧光探针
    1.8 SiRNA的转染技术
    1.9 TUNEL 检测细胞凋亡
    1.10 统计与方法
2.结果
    2.1 白蛋白超负荷可加重肾小管上皮细胞凋亡
    2.2 白蛋白超负荷导致肾小管上皮细胞内线粒体超微结构异常,并有自噬体的形成
    2.3 白蛋白超负荷导致肾小管上皮细胞中线粒体的膜电位下降
    2.4 白蛋白超负荷导致肾小管上皮细胞线粒体内细胞色素C释放
    2.5 白蛋白超负荷对肾小管上皮细胞中自噬水平的影响及Pink1、Parkin蛋白表达的影响
    2.6 敲低PARK2后,肾小管上皮细胞内Parkin蛋白表达以及自噬和线粒体自噬水平变化
3 讨论
    3.1 尿蛋白中的主要成份（白蛋白）诱导了肾小管上皮细胞凋亡及线粒体损伤
    3.2 白蛋白超负荷损伤的线粒体诱导了肾小管上皮细胞自噬激活,且为线粒体自噬
    3.3 白蛋白超负荷损伤的线粒体通过Pink/Parkin通路激活了线粒体自噬
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 自噬在尿蛋白所致肾脏固有细胞损伤中的作用及其机制
    综述参考文献
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]eNOS参与铁过载诱导的血管内皮细胞线粒体损伤[J]. 何欢,张泽宇,刘丹,廖章萍,尹东,何明.  中国药理学通报. 2017(10)
[2]蛋白尿加速慢性肾脏病进展的分子机制[J]. 李丹,丁洁.  北京大学学报(医学版). 2010(05)



本文编号：3031326