sM8a对前列腺癌LNCaP细胞体外肿瘤生物学行为的影响及调控机制

发布时间：2021-02-17 09:30

　　第一部分sM8α真核表达载体的构建、扩增、测序鉴定及体外表达验证目的：检测前列腺癌三系LNCaP、PC-3、DU145细胞中sM8α的表达,并构建sM8α真核表达载体（pcDNA3.1（-）-sM8a-His质粒）并进行测序。测序鉴定成功后,将pcDNA3.1（-）-sM8a-His质粒转染雄激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞,为研究sM8α对前列腺癌肿瘤生物学行为的影响提供实验基础。方法：1)逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测前列腺癌三系LNCaP、 PC-3、DU145细胞中sM8α的表达,通过高保真PCR获得sM8a-His片段,通过双酶切和T4连接酶构建pcDNA3.1（-）-sM8a-His质粒,进行测序后,与pubmed上的基因序列进行比对。2)传代培养293T细胞,并将pcDNA3.1（-）-sM8a-His质粒及空载对照质粒分别转染到293T细胞中,48h后western-bloting鉴定sM8a-His融合蛋白表达。结果：RT-PCR检测到sM8a mRNA在三种前列腺癌细胞中低表达。成功构建pcDNA3.1（-）-sM8a-His质粒并且测序完全正确。pcDN... 

【文章来源】：武汉大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：88 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
引言
第一部分 sM8α真核表达载体的构建、扩增、测序鉴定及体外表达验证
    材料和方法
    研究结果
    讨论
第二部分 sM8α对前列腺癌LNCaP细胞体外肿瘤生物学行为影响
    材料和方法
    研究结果
    讨论
第三部分 前列腺癌LNCaP细胞中sM8α和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的关系
    材料和方法
    研究结果
    讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读博士期间发表的科研成果目录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]有丝分裂激活蛋白激酶激活与前列腺癌的恶化进展[J]. 叶定伟,李慧,Priscilla Chauvin,孙颖浩,钱松溪,郑家富,马永江.  肿瘤防治杂志. 2002(02)



本文编号：3037789