miR-130b调控TGF-β1/Smads信号通路对糖尿病肾脏纤维化的作用和机制研究
发布时间：2021-02-18 20:40
糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）是糖尿病众多慢性并发症中最常见和最严重的一种,DN的重要病理基础是肾小球系膜细胞增生和细胞外基质（ECM）堆积诱发肾小球硬化,TGF-β1是最重要的致纤维化因子。研究表明,miR-130b在DN患者外周血和DN小鼠肾组织中均显著降低,提示miR-130b可能受TGF-β1调控而发生表达水平的改变,而TGF-β1是诱导DN发生的关键调节因子,从而加重肾脏纤维化,可能的机制主要是利用TGF-β1/Smads途径调节下游纤维化因子ColI、ColIV、FN等靶基因的表达,但其具体的调控机制尚不清楚。因此,阐明TGF-β1/Smads和mi R-130b之间的相互作用,对了解和防治糖尿病肾病具有十分重要意义。研究目的:本项目重点研究人肾小球系膜HMC细胞在高糖环境、TGF-β1诱导及转染miR-130b mimics/inhibitor后HMC细胞纤维化的内在联系,揭示mi R-130b在DN中纤维化过程中的作用机制,为DN的预防、诊断和治疗提供新思路。研究方法:1.临床标本已征得河南科技大学伦理委员会审核批准及病人本人同意并签署知情...
【文章来源】：河南科技大学河南省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 前言
1.1 研究现状、成果
1.2 研究目的、方法
1.3 创新点
1.4 展望
第2章 材料与方法
2.1 糖尿病肾病病人病理切片材料与方法
2.1.1 研究对象
2.1.2 主要实验试剂
2.1.3 主要仪器设备
2.1.4 试剂配制
2.1.5 标本处理
2.1.6 HE染色
2.1.7 Mason染色
2.1.8 免疫组化
2.2 HMC细胞培养方法及各实验分组
2.2.1 细胞株
2.2.2 主要实验试剂
2.2.3 主要实验仪器
2.2.4 常用试剂配制
2.2.5 细胞培养方法
2.2.6 实验细胞分组
2.2.7 Western blot实验
2.2.8 qRT-PCR实验
2.2.9 免疫荧光实验
第3章 结果
3.1 糖尿病肾病病人病理切片特征结果
3.1.1 HE染色结果
3.1.2 Masson染色结果
3.1.3 免疫组化染色结果
3.2 高糖培养HMC细胞结果
3.2.1 qRT-PCR检测miR-130b结果
3.2.2 纤维化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN结果
3.3 miR-130b对HMC细胞纤维化的影响结果
3.3.1 qRT-PCR检测miR-130b结果
3.3.2 纤维化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN结果
3.3.3 纤维化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN免疫荧光结果
3.4 TGF-β1对HMC细胞的影响结果
3.4.1 qRT-PCR检测miR-130b结果
3.4.2 纤维化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN结果
3.4.3 纤维化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN免疫荧光结果
3.5 miR-130b对TGF-β1诱导的HMC细胞的影响结果
3.5.1 qRT-PCR检测miR-130b结果
3.5.2 纤维化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN结果
3.5.3 纤维化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN免疫荧光结果
3.6 miR-130b对TGF-β1诱导的HMC细胞Smads蛋白的影响结果
3.6.1 qRT-PCR检测Smads蛋白mRNA结果
3.6.2 Western blot检测Smads蛋白结果
3.6.3 Smads蛋白免疫荧光结果
第4章 讨论
4.1 糖尿病肾病病人病理切片特征讨论
4.2 高糖培养HMC细胞讨论
4.3 miR-130b对HMC细胞纤维化的影响的讨论
4.4 TGF-β1对HMC细胞的影响的讨论
4.5 miR-130b对TGF-β1诱导的HMC细胞的影响的讨论
4.6 miR-130b对TGF-β诱导的HMC细胞Smads蛋白的影响的讨论
第5章 结论
参考文献
缩略语词汇表
附录I 图及说明
致谢
攻读学位期间的研究成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]糖尿病肾病的动物模型[J]. 朱红平,刘芳,付平. 中国中西医结合肾病杂志. 2015(07)
[2]冬虫夏草对大鼠糖尿病肾病的保护作用机制研究[J]. 张莉,鄢艳,胡秀华,何艳. 江西医药. 2014(11)
本文编号：3040067
【文章来源】：河南科技大学河南省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 前言
1.1 研究现状、成果
1.2 研究目的、方法
1.3 创新点
1.4 展望
第2章 材料与方法
2.1 糖尿病肾病病人病理切片材料与方法
2.1.1 研究对象
2.1.2 主要实验试剂
2.1.3 主要仪器设备
2.1.4 试剂配制
2.1.5 标本处理
2.1.6 HE染色
2.1.7 Mason染色
2.1.8 免疫组化
2.2 HMC细胞培养方法及各实验分组
2.2.1 细胞株
2.2.2 主要实验试剂
2.2.3 主要实验仪器
2.2.4 常用试剂配制
2.2.5 细胞培养方法
2.2.6 实验细胞分组
2.2.7 Western blot实验
2.2.8 qRT-PCR实验
2.2.9 免疫荧光实验
第3章 结果
3.1 糖尿病肾病病人病理切片特征结果
3.1.1 HE染色结果
3.1.2 Masson染色结果
3.1.3 免疫组化染色结果
3.2 高糖培养HMC细胞结果
3.2.1 qRT-PCR检测miR-130b结果
3.2.2 纤维化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN结果
3.3 miR-130b对HMC细胞纤维化的影响结果
3.3.1 qRT-PCR检测miR-130b结果
3.3.2 纤维化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN结果
3.3.3 纤维化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN免疫荧光结果
3.4 TGF-β1对HMC细胞的影响结果
3.4.1 qRT-PCR检测miR-130b结果
3.4.2 纤维化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN结果
3.4.3 纤维化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN免疫荧光结果
3.5 miR-130b对TGF-β1诱导的HMC细胞的影响结果
3.5.1 qRT-PCR检测miR-130b结果
3.5.2 纤维化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN结果
3.5.3 纤维化蛋白因子ColⅠ、ColⅣ、FN免疫荧光结果
3.6 miR-130b对TGF-β1诱导的HMC细胞Smads蛋白的影响结果
3.6.1 qRT-PCR检测Smads蛋白mRNA结果
3.6.2 Western blot检测Smads蛋白结果
3.6.3 Smads蛋白免疫荧光结果
第4章 讨论
4.1 糖尿病肾病病人病理切片特征讨论
4.2 高糖培养HMC细胞讨论
4.3 miR-130b对HMC细胞纤维化的影响的讨论
4.4 TGF-β1对HMC细胞的影响的讨论
4.5 miR-130b对TGF-β1诱导的HMC细胞的影响的讨论
4.6 miR-130b对TGF-β诱导的HMC细胞Smads蛋白的影响的讨论
第5章 结论
参考文献
缩略语词汇表
附录I 图及说明
致谢
攻读学位期间的研究成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]糖尿病肾病的动物模型[J]. 朱红平,刘芳,付平. 中国中西医结合肾病杂志. 2015(07)
[2]冬虫夏草对大鼠糖尿病肾病的保护作用机制研究[J]. 张莉,鄢艳,胡秀华,何艳. 江西医药. 2014(11)
本文编号：3040067
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