DNMT1联合SATB1在膀胱尿路上皮癌中的表达及其意义

发布时间：2021-02-20 20:08

　　目的：本研究以膀胱尿路上皮癌患者的癌组织及正常人的膀胱组织为研究对象,采用RT-PCR、免疫组化方法检测膀胱尿路上皮癌组织及正常膀胱组织的DNMT1、 SATB1的mRNA及蛋白的表达水平,并进行相关性比较。材料与方法：收集从2011年8月到2012年6月在新乡医学院第一附属医院泌尿外科膀胱尿路上皮癌手术切除标本50例。标本均经病理学确诊为膀胱尿路上皮癌,术前均未经过化疗和放疗；另取15例正常人的膀胱组织做为对照（膀胱镜检时经患者同意所取得）。每例标本均分为两份,一份液氮储存以备采用RT-PCR检测膀胱尿路上皮癌组织及正常膀胱粘膜组织中DNMT1、SATB1mRNA的表达。另一份采用多聚甲醛固定,常规脱水,石蜡包埋,3um连续切片,并烘干,脱蜡,水化,进行链霉素抗生物素——过氧化酶（streptavidin peroxidase, SP）免疫组化染色,检测膀胱尿路上皮癌组织及正常膀胱粘膜组织中DNMT1、SATB1蛋白的表达情况,探讨DNMT1、SATB1的表达与患者临床病理分级及分期的关系,及DNMT1与SATB1的蛋白表达在膀胱尿路上皮癌中的相互关系。每个切片分别随机选取不重叠的5... 

【文章来源】：新乡医学院河南省

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
目录
摘要
Abstract
前言
第一部分
    1 材料与方法
        1.1 研究对象
        1.2 主要试剂仪器来源
        1.3 常用试剂配制
    2 实验方法
        2.1 膀胱尿路上皮癌组织及正常组织中的总RNA的抽提
        2.2 RNA鉴定
        2.3 逆转录cDNA合成
        2.4 引物的设计及序列
        2.5 PCR反应
    3 统计学分析
    4 结果
第二部分
    1 材料与方法
        1.1 研究对象
        1.2 试剂仪器主要来源
        1.3 实验所使用溶液的配制
            1.3.1 PBS的配制
            1.3.2 苏木精液配制
            1.3.3 柠檬酸液的配制
            1.3.4 固定液4%多聚甲醛的配制
    2 实验方法
        2.1 组织的相关处理
            2.1.1 取材后将组织进行固定
            2.1.2 将组织充分洗涤以去除固定液
            2.1.3 将组织进行脱水
            2.1.4 使组织透明
            2.1.5 组织的浸蜡
            2.1.6 组织的包埋
            2.1.7 组织的切片及捞片,烤片
        2.2 免疫组织化学SP法检测SATB蛋白及SATB1蛋白的表达
            2.2.1 脱蜡以及水化
            2.2.2 抗原修复
            2.2.3 清洗组织片
            2.2.4 消除组织内的内源性过氧化物酶
            2.2.5 非特异染色阻断剂的运用
            2.2.6 除去非特异染色阻断剂
            2.2.7 除去PBS液
            2.2.8 除去PBS液
            2.2.9 记录图片
        2.3 SATB1/DNMT1在膀胱癌中及正常膀胱组织中的蛋白表达的测量
    3 统计学分析
    4 结果
        4.1 SATB1/DNMT1在膀胱癌及正常膀胱粘膜组织中的表达情况
        4.2 SATB1/DNMT1在膀胱尿癌中的表达与临床病理分级与分期的关系
        4.3 SATB1/DNMT1在膀胱癌中的阳性表达的相关性
第三部分
参考文献
综述 SATB1及DNMT1与肿瘤关系的研究进展
    参考文献
英文縮略词表
攻读学位期间发表文章情况
致谢
个人简历



本文编号：3043280