CD40 siRNA对MRL/Lpr小鼠狼疮肾炎的治疗作用
发布时间：2021-03-03 19:56
目的:观察CD40的小干扰RNA（siRNA）对系统性红斑狼疮（SLE）动物模型MRL/Lpr小鼠肾脏、尿蛋白和补体C3的影响,探讨CD40 siRNA对狼疮肾炎的治疗作用。方法:16只MRL/Lpr小鼠随机分为对照组、空载体组、CD40-siRNA1组及CD40-siRNA2组,每组4只,将成功构建的CD40 siRNA表达载体尾静脉注射MRL/Lpr小鼠,对照组和空载体组小鼠分别注射等剂量、等比例的磷酸盐缓冲液（PBS）和p GFP-V-RS空载体。每隔1天1次,共6次。处死前24 h留取24 h的尿量。14d处死小鼠,肾脏组织切片在荧光显微镜下观察其是否在小鼠肾脏中表达,RT-PCR法检测小鼠肾脏组织中CD40 mRNA的表达水平;免疫组化法检测小鼠肾脏组织中CD40蛋白的表达水平;病理切片苏木精-伊红（HE）染色法观察4组小鼠肾脏的病理变化,考马斯亮蓝染色法检测24 h尿蛋白含量,免疫比浊检测小鼠补体C3的水平。结果:CD40 siRNA表达载体可以在MRL/Lpr小鼠的肾脏中表达。注射后14 d CD40-siRNA1组和CD40-siRNA2组的MRL/Lpr小鼠肾脏组织中...
【文章来源】：中国免疫学杂志. 2015,31(08)北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
CD40siＲNA真核表达载体在小鼠肾脏中的表达Fig．1ExpressionofCD40siＲNAinkidneyfromMＲL/
和空载体组，对照组和空载体组比较差异不明显，siＲNA1组和siＲNA2组比较也无明显差异。见图2(附:上述应用的为荧光免疫组化，无需染色，放大倍数为10倍)。2.44组小鼠的病理改变光镜下观察肾脏的病表14组小鼠肾脏中CD40mＲNA表达水平(x±s)Tab．1ExpressionlevelsofCD40mＲNAinkidneyfromMＲL/Lprmice(x±s)Groups2-ΔΔCtControlgroup1.00±0.00Emptyvectorgroup1.02±0.02CD-40siＲNA1group0.34±0.111)CD-40siＲNA2group0.23±0.151)Note:Comparedwithcontrolgroupandemptyvectorgroup，1)P＜0.05.图24组小鼠肾脏中CD40蛋白的表达水平Fig．2ExpressionlevelsofCD40proteininkidneyfromMＲL/Lprmice理切片，结果发现:对照组的肾小球炎性细胞浸润，肿大，肾小管肿胀，可见管型，空载体组与对照组的病理类型一致，而CD40-siＲNA1组和CD40-siＲNA2组中的小鼠肾脏病理显示:肾小球和肾小球浸润的炎性细胞减少，肾小管肿胀程度减轻，见图3。2.54组小鼠CD40siＲNA注射后24h尿蛋白的变化24h尿蛋白检测结果显示:CD40-siＲ-NA1组和CD40-siＲNA2组中的小鼠24h尿蛋白的浓度分别为(202.50±26.30)mg/dl和(201.25±28.39)mg/dl显著低于对照组和空载体组狼疮鼠的浓度，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表2。2.64组小鼠CD40siＲNA注射后补体C3的表达水平注射后14d处死小鼠，CD-40siＲNA1组和CD-40siＲNA2组小鼠血清中补体C3的表达明显高于对照组和空载体组，差异有统计学意义(P＜0.05)，对照组和空载体组比较差异无统计学意义(P＞0.05)，CD-40siＲNA1组和CD-40siＲNA2组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。见图4。图34组小鼠肾组织病理学改变(HE，×200)Fig．3ChangesofrenalhistopathologyinMＲL/Lprmouse(HE，×200)?
蛋白检测结果显示:CD40-siＲ-NA1组和CD40-siＲNA2组中的小鼠24h尿蛋白的浓度分别为(202.50±26.30)mg/dl和(201.25±28.39)mg/dl显著低于对照组和空载体组狼疮鼠的浓度，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表2。2.64组小鼠CD40siＲNA注射后补体C3的表达水平注射后14d处死小鼠，CD-40siＲNA1组和CD-40siＲNA2组小鼠血清中补体C3的表达明显高于对照组和空载体组，差异有统计学意义(P＜0.05)，对照组和空载体组比较差异无统计学意义(P＞0.05)，CD-40siＲNA1组和CD-40siＲNA2组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。见图4。图34组小鼠肾组织病理学改变(HE，×200)Fig．3ChangesofrenalhistopathologyinMＲL/Lprmouse(HE，×200)表24组小鼠24h尿蛋白的浓度(x±s，mg/dl)Tab．2UrinaryProteincontentofMＲL/Lprmicein4groups(x±s，mg/dl)Groups24hurinaryproteinControlgroup290.00±31.62vectorgroup295.50±9.15CD-40siＲNA1group202.50±26.301)CD-40siＲNA2group201.25±28.391)Note:Comparedwithcontrolgroupandemptyvectorgroup，1)P＜0.05.庞春艳等CD40siＲNA对MＲL/Lpr小鼠狼疮肾炎的治疗作用第8期1091
【参考文献】：
期刊论文
[1]白芍总苷对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的影响[J]. 丁朝霞,杨少锋,吴启富,鲁莹,陈育尧,聂晓莉,接红宇,戚晶敏,王繁盛. 南方医科大学学报. 2011(04)
本文编号：3061840
【文章来源】：中国免疫学杂志. 2015,31(08)北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
CD40siＲNA真核表达载体在小鼠肾脏中的表达Fig．1ExpressionofCD40siＲNAinkidneyfromMＲL/
和空载体组，对照组和空载体组比较差异不明显，siＲNA1组和siＲNA2组比较也无明显差异。见图2(附:上述应用的为荧光免疫组化，无需染色，放大倍数为10倍)。2.44组小鼠的病理改变光镜下观察肾脏的病表14组小鼠肾脏中CD40mＲNA表达水平(x±s)Tab．1ExpressionlevelsofCD40mＲNAinkidneyfromMＲL/Lprmice(x±s)Groups2-ΔΔCtControlgroup1.00±0.00Emptyvectorgroup1.02±0.02CD-40siＲNA1group0.34±0.111)CD-40siＲNA2group0.23±0.151)Note:Comparedwithcontrolgroupandemptyvectorgroup，1)P＜0.05.图24组小鼠肾脏中CD40蛋白的表达水平Fig．2ExpressionlevelsofCD40proteininkidneyfromMＲL/Lprmice理切片，结果发现:对照组的肾小球炎性细胞浸润，肿大，肾小管肿胀，可见管型，空载体组与对照组的病理类型一致，而CD40-siＲNA1组和CD40-siＲNA2组中的小鼠肾脏病理显示:肾小球和肾小球浸润的炎性细胞减少，肾小管肿胀程度减轻，见图3。2.54组小鼠CD40siＲNA注射后24h尿蛋白的变化24h尿蛋白检测结果显示:CD40-siＲ-NA1组和CD40-siＲNA2组中的小鼠24h尿蛋白的浓度分别为(202.50±26.30)mg/dl和(201.25±28.39)mg/dl显著低于对照组和空载体组狼疮鼠的浓度，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表2。2.64组小鼠CD40siＲNA注射后补体C3的表达水平注射后14d处死小鼠，CD-40siＲNA1组和CD-40siＲNA2组小鼠血清中补体C3的表达明显高于对照组和空载体组，差异有统计学意义(P＜0.05)，对照组和空载体组比较差异无统计学意义(P＞0.05)，CD-40siＲNA1组和CD-40siＲNA2组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。见图4。图34组小鼠肾组织病理学改变(HE，×200)Fig．3ChangesofrenalhistopathologyinMＲL/Lprmouse(HE，×200)?
蛋白检测结果显示:CD40-siＲ-NA1组和CD40-siＲNA2组中的小鼠24h尿蛋白的浓度分别为(202.50±26.30)mg/dl和(201.25±28.39)mg/dl显著低于对照组和空载体组狼疮鼠的浓度，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表2。2.64组小鼠CD40siＲNA注射后补体C3的表达水平注射后14d处死小鼠，CD-40siＲNA1组和CD-40siＲNA2组小鼠血清中补体C3的表达明显高于对照组和空载体组，差异有统计学意义(P＜0.05)，对照组和空载体组比较差异无统计学意义(P＞0.05)，CD-40siＲNA1组和CD-40siＲNA2组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。见图4。图34组小鼠肾组织病理学改变(HE，×200)Fig．3ChangesofrenalhistopathologyinMＲL/Lprmouse(HE，×200)表24组小鼠24h尿蛋白的浓度(x±s，mg/dl)Tab．2UrinaryProteincontentofMＲL/Lprmicein4groups(x±s，mg/dl)Groups24hurinaryproteinControlgroup290.00±31.62vectorgroup295.50±9.15CD-40siＲNA1group202.50±26.301)CD-40siＲNA2group201.25±28.391)Note:Comparedwithcontrolgroupandemptyvectorgroup，1)P＜0.05.庞春艳等CD40siＲNA对MＲL/Lpr小鼠狼疮肾炎的治疗作用第8期1091
【参考文献】：
期刊论文
[1]白芍总苷对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的影响[J]. 丁朝霞,杨少锋,吴启富,鲁莹,陈育尧,聂晓莉,接红宇,戚晶敏,王繁盛. 南方医科大学学报. 2011(04)
本文编号：3061840
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