转录因子KLF14在高脂饮食诱导肾损伤中的作用研究

发布时间：2021-03-04 01:16

　　目的:全基因组关联分析显示转录因子Kruppel-like factor 14（KLF14）与2型糖尿病及脂质代谢有关,也有研究显示KLF14敲除的小鼠可引起中心体扩增、染色体非整倍性和自发性肿瘤的发生,然而其在肾脏中的作用尚不清楚,因此我们建立了KLF14基因敲除（KLF14-/-）C57BL/6小鼠模型,拟以此来研究转录因子KLF14在肾脏的功能及在肾损伤中的作用。方法和结果:利用新型基因组编辑技术-转录激活效应因子核酸酶（TALEN）技术建立KLF14基因敲除小鼠模型。血生化分析显示,与野生鼠相比,KLF14基因敲除鼠的高密度脂蛋白胆固醇有显著性降低。通过P AS染色观察野生鼠与KLF14基因敲除鼠肾小球的病理改变,用PCNA免疫组化染色判断肾小球细胞增殖情况。结果显示,与野生组相比,KLF14基因敲除鼠肾小球可见到较重的细胞外基质（ECM）聚集和系膜细胞增生;PCNA染色结果显示KLF14基因敲除鼠肾小球细胞的PCNA阳性率明显高于野生组。通过高通量测序技术RNA-seq技术比较了野生鼠及KLF14基因敲除鼠肾脏中mRNA表达差异,发现两者有38个差异表达基因。在KLF14基因... 

【文章来源】：中国人民解放军医学院北京市

【文章页数】：106 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．２测序鉴定小鼠ＫＬＦ１４基因敲除Ａ：野生鼠，敲除鼠Ａ和敲除鼠Ｂ的ＤＮＡ序列

ＫＬＦ１４基因敲除鼠的基本特征改变???ＫＬＦ１４基因敲除鼠的体重及血生化改变??了明确ＫＬＦ１４基因的缺失对小鼠的影响，在小鼠处死前分别称量体重并取ＫＬＦ１４基因敲除鼠的血液和２４ｈ尿液来比较两组整体差异．结果显示，体重，胆固醇，低密度脂蛋白，甘油三酯和血糖水平以及肾功能指标在两组之间并差异，ＫＬＦ１４基因敲除组小鼠血清的高密度脂蛋白水平要明显低于ＫＬＦ１４＋／＋差异有显著性意义（表１－１）。??

?Ｋ．Ｖ??ｈ?：?ｖ?如??图１．５肾脏组织的免疫组化检测ＰＣＮＡ的变化，以判断肾小球细胞增殖比率。（Ａ）肾小球的??免疫组化检测ＰＣＮＡ的差异（Ｂ）ＫＬＦ１４基因敲除组（ＫＬＦ１４－／－）的ＰＣＮＡ阳性率比野生组??（ＫＬＦ１４＋／＋）高，且差异具有统计学意义。每组小鼠取７只，每个小鼠取２０个肾小球进行??计数。所有数值采用均数±标准差表示．与野生组（ＫＬＦ１４＋／＋）比较，＊＊Ｐ＜０．０１。??２９??


本文编号：3062301