维生素D受体激动剂对高糖诱导HK-2细胞RhoA活化的影响

发布时间：2021-03-15 14:34

　　目的：通过观察维生素D受体激动剂活性维生素D（1,25-（OH）-2D3, VitD3）及其类似物埃罗骨化醇（BXL-628）对高糖诱导人肾小管上皮细胞（HK-2） RhoA活化的影响,研究其对HK-2细胞间充质转分化及细胞外基质的作用,并探讨其可能机制。方法：体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,（1）使用高糖培基（30mmol/L）刺激HK-2细胞。使用Western Blot观察0min、30min、1h、2h、4h、8h、12h活性RhoA蛋白的表达情况；（2）分别使用Western Blot及RealTime PCR观察Oh、12h、24h、48h、72h时α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和E钙粘素（E-cadherin）蛋白及mRNA的表达；（3）将HK-2细胞设正常对照组（葡萄糖5.6mmol/mL）高糖（葡萄糖30mmol/mL）组、VitD3组（高糖+VitD3,10-7mol/L）组、BXL-628组（高糖+BXL-628,10-5nmol/L）,使用RealTime PCR、 Western Blot方法观察各组细胞48h α-SMA、E-cadherin蛋白及mRN... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

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min、30min、1 h、2 h、4h、8 h、12 h)刺激HK-2细胞，并使用相同浓度的甘露醇培基做对照试验。Western Blot结果如图3-2所示，在高糖刺激下HK-2细胞在30 min之内即出现活化，活性RhoA蛋白表达增加，2小时活化达到高峰，较0 min增加1.94 土 0.22倍，1 h至8 h间均维持在较高水平。12 h点仍高于Omin,1 h、2 h、4 h、8h点对比0 min P值均< 0.05，12 h点P值> 0.05。甘露醇对照组提示，等浓度甘露醇对HK-2细胞RhoA活化无明显影响

12 h点P值> 0.05。甘露醇对照组提示，等浓度甘露醇对HK-2细胞RhoA活化无明显影响，P值>0.05。如图3-3所示，免疫荧光定性实验结果同样提示在高糖刺激2h后RhoA出现明显活化，对比正常对照组，高糖组绿色荣光表达明显增强，且焚光表达多集中于细胞膜处。15

【参考文献】：
期刊论文
[1]维生素D受体基因BsmI多态性与2型糖尿病肾病的关系[J]. 易斌,张浩,赵延,王建文,蔡旭,刘妍,孙剑.  中华肾脏病杂志. 2012 (04)
[2]上皮间质转化（EMT）及其分子机制[J]. 姚婵,来茂德.  国际遗传学杂志. 2006(04)



本文编号：3084348