糖尿病肾病系膜细胞源外泌体促进足细胞损伤的机制及小檗碱的作用

发布时间：2021-03-18 10:27

　　糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）是糖尿病（diabetes mellitus,DM）最严重的微血管并发症之一。这种疾病是由于伴随持续高血糖和DM状态下的血流动力学因素,导致肾小球、肾小管或肾间质的损害。足细胞和肾小球系膜细胞（glomerular mesangial cells,GMCs）是肾小球中不可或缺的两类细胞,其异常的功能变化对DN的发展起到了关键的作用。外泌体是由细胞分泌的微囊泡,包含了多种分子,例如蛋白质、脂质、DNA、mi RNA和micro RNA。它们在细胞通信中的作用引起了人们的广泛关注。课题组前期研究显示,高糖（high glucose,HG）诱导的GMCs释放的外泌体可能通过携带TGF-β1细胞因子并影响足细胞功能。但是其更深入的机制暂时还不清楚。PI3K/Akt/FOXO信号通路在细胞存活和凋亡中起到了重要作用,FOXO被Akt在Thr24,Ser256,Ser319上磷酸化,促进它们的出核转运和转录激活。越来越多的证据表明F0X01具有抑癌作用,因为它在多种癌症中具有抗增殖和促凋亡活性。小檗碱（berberine,BBR）是从黄连... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

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英文缩略词对照表（Abbreviation）
摘要
Abstract
1 前言
2 材料与仪器
    2.1 细胞株
    2.2 化学药品和试剂
    2.3 仪器与设备
3 实验方法
    3.1 GMCs的培养和分组
    3.2 足细胞的培养和分组
    3.3 外泌体的的分离
    3.4 GMCs与足细胞共培养
    3.5 外泌体的鉴定和摄取
        3.5.1 外泌体的标志蛋白鉴定
        3.5.2 外泌体的电镜观察与鉴定
        3.5.3 外泌体的粒径分布
        3.5.4 外泌体的摄取鉴定
    3.6 细胞凋亡检测
    3.7 免疫荧光实验
    3.8 细胞迁移能力检测实验
    3.9 Western blot检测
    3.10 体内研究
    3.11 组织学
    3.12 免疫组织化学
    3.13 数据分析
4 实验结果
    4.1 分离鉴定系膜细胞（GMCs）源外泌体
    4.2 GMCs源外泌体被足细胞摄取
    4.3 确定GMCs源外泌体对足细胞影响的最佳条件
    4.4 高糖诱导GMCs源外泌体参与足细胞功能的损伤
    4.5 检测BBR的最适浓度
    4.6 检测TGF-β1抑制剂的最适浓度
    4.7 BBR改善高糖诱导GMCs源外泌体对足细胞功能的损伤
    4.8 BBR 改善高糖诱导 GMCs 源外泌体对足细胞的损伤作用可能是与调节PI3K-AKT-FOXO1-Bim/mTORC1 信号通路有关
    4.9 高糖诱导GMCs源外泌体对小鼠肾功能参数的影响
    4.10 高糖诱导的GMCs源外泌体对小鼠肾脏组织病理学的影响
    4.11 高糖诱导的GMCs源外泌体对小鼠肾皮质中WT-1 蛋白分布和表达的影响
    4.12 PI3K/AKT-Bim 信号通路参与了高糖诱导 GMCs 源外泌体引起的的肾小球损伤
5 讨论
6 结论
参考文献
附录 个人简历
致谢
综述 不同来源的外泌体对糖尿病肾病的影响
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]小檗碱对高脂合并STZ诱导的糖尿病肾病大鼠肾脏FN与CTGF表达的影响[J]. 王凤玲,唐丽琴,杨峰,朱玲娜,蔡明,魏伟.  安徽医药. 2013(04)



本文编号：3088175