MCM3在膀胱癌中的表达及对膀胱癌细胞增殖和侵袭能力的影响

发布时间：2021-03-21 04:17

　　目的:明确MCM3基因在膀胱癌组织、癌旁正常膀胱组织及在膀胱癌细胞系中的表达情况,分析MCM3基因在正常与癌组织中的表达差异,阐明其表达水平与膀胱癌患者临床病理特征之间的相关性和临床意义,同时通过体外细胞实验证实MCM3在膀胱癌细胞增殖和侵袭中发挥的作用。方法:利用膀胱癌组织和癌旁正常膀胱组织标本及膀胱癌细胞系5637和T24,通过实时定量PCR检测膀胱癌组织和癌旁正常膀胱组织MCM3 mRNA的表达水平。同时使用实时定量PCR和Western Blot检测MCM3在膀胱癌细胞系5637和T24中mRNA和蛋白质的表达水平。用脂质体转染法对膀胱癌细胞系进行MCM3特异的siRNA转染,利用CCK8,Transwell等实验对MCM3在膀胱癌细胞增殖、侵袭中的作用进行研究。结果:在临床标本中的检测MCM3的表达水平,膀胱癌组织中表达显著高于癌旁正常组织中的表达,且与膀胱癌浸润性、临床分期、复发和转移正相关。在细胞水平上,MCM3表达水平随着膀胱癌细胞恶性程度的增高而增高。特异性的siRNA转染细胞后进行RNA与蛋白质检测证实,MCM3被有效敲除。CCK8实验显示,MCM3敲除组与对照组相... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：40 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

MCM3mRNA在膀胱癌组织和癌旁正常膀胱组织中的表达情况

CM3 mRNA 在膀胱癌细胞系 5637, T24 和正常膀胱细胞系 SV-HUC***代表 p<0.01。estern Blot 检测 SV-HUC-1、T24、5637 三种膀胱癌细胞系源性表达水平3 种细胞中 MCM3 在蛋白水平的内源性表达进行检测，结果显示（CM3 蛋白在 SV 膀胱永生化细胞、T24、5637 两种膀胱癌细胞系M3 的蛋白水平在 T24（0.37±0.02, n=5）、5637（0.33±0.01, n=5的表达量高于 SV（0.16±0.03, n=5）膀胱永生化细胞系。

图 2. MCM3 mRNA 在膀胱癌细胞系 5637, T24 和正常膀胱细胞系 SV-HUC-1 中的表达情况。***代表 p<0.01。3.3、Western Blot 检测 SV-HUC-1、T24、5637 三种膀胱癌细胞系的 MCM3蛋白内源性表达水平对 3 种细胞中 MCM3 在蛋白水平的内源性表达进行检测，结果显示（图 3a 和3b）：MCM3 蛋白在 SV 膀胱永生化细胞、T24、5637 两种膀胱癌细胞系内均能表达，MCM3 的蛋白水平在 T24（0.37±0.02, n=5）、5637（0.33±0.01, n=5）膀胱癌细胞系中的表达量高于 SV（0.16±0.03, n=5）膀胱永生化细胞系。


本文编号：3092307