EN2在前列腺癌细胞株及前列腺癌组织中的表达

发布时间：2021-03-23 09:20

　　目的本课题通过对体外培养的不同特性的前列腺癌细胞株（LNCAP、PC3、DU145）及人正常前列腺腺上皮细胞（RWPE-1）中EN2（Engrailed-2）表达进行检测，通过对前列腺癌患者肿瘤组织及前列腺增生患者组织中EN2表达情况分析，并分析EN2蛋白表达水平与前列腺癌病理分级之间的关系。探求EN2与前列腺癌的相关性，旨在寻求和发现一种对前列腺癌患者具有临床应用价值的早期诊断、预防、治疗的标志物。方法通过细胞免疫荧光和逆转录聚合酶反应（RT-PCR）方法对不同前列腺癌细胞系（LNCAP、PC3、DU145）和人正常前列腺腺上皮细胞（RWPE-1）中EN2mRNA及蛋白进行检测。通过对暨南大学附属第一医院2007.4-2012.3年间51例经病理确诊为前列腺癌的患者调取临床资料和病理标本，并选取57例良性前列腺增生患者组织，进行EN2的免疫组化染色、Western blot检测。并分析EN2表达水平与前列腺癌病理分级间之间的关系。结果1.前列腺癌细胞株中EN2在蛋白水平和分子水平都较人正常前列腺上皮细胞高表达；2. EN2在激素依赖性前列腺癌细胞表达水平又较激素非依赖性前列腺癌细胞增... 

【文章来源】：暨南大学广东省 211工程院校

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

-1含有同源框结构的蛋白具有调节细胞周期的作用注：HOX11、HSIX1、MSX1和GAX为含有同源框结构的蛋白质，其中HSIX1、MSX1

一． 图1. EN2蛋白功能域示意图注：引自Richard Morgan[22]作为细胞间传递信息的转录因子，EN2 可通过非经典蛋白分泌途径和内摄活动而被细胞分泌和内摄[23]。绝大部分 EN-2 作为转录因子定位于核内并通过其DNA 结合结构域与特异的 DNA 结合从而激活其下游基因的转录来执行转录因子的相关功能[24, 25]，但是亦有少部分 EN2（< 5%）位于胞浆内[26]。Engrailed 基因最初被认为只是果蝇的一个节段极性基因，随后研究发现 EN-2 蛋白参与了机体的多种病理生理活动，如胚胎发育[27]、突触选择[28]、视神经轴突导向[19]、帕金森综合症、自闭症等。二、EN2 与肿瘤关系最近研究发现，EN2 还与某些肿瘤的发生有关。Martin 等[29]使 EN2 在人正常乳腺上皮细胞系中异位表达后，人正常乳腺上皮细胞则表现出恶性病变的特性，如细胞周期缩短、细胞与细胞间的接触性丧失，应用 RNA 干扰技术使人乳

）中的 RT-PCR 的检测A 鉴定分光光度计测定 OD260 和 OD280 值，计算所用样品中 RNA 的含/A280 值在 LNCAP、DU145、PC3 前列腺癌细胞系及人正常前列腺PE-1 分别为：2.10、2.02、2.03、1.80，均在 1.8~2.0 附近，说明 Rtion 的检测及 EN2 基因 PCR 扩增产物电泳结果n 作为内参在 LNCAP、DU145 和 PC3 前列腺癌细胞系，人正常前 RWPE-1 中的表达，扩增片段大小与预期相符，扩增条带亮度也相样品中提取总RNA量一致，β-action可以作为RT-PCR分析的内参因在人正常前列腺上皮细胞 RWPE-1 中呈现弱表达，在前列腺癌细、DU145 和 PC3 中明显表达，其中在 PC3 和 DU145 细胞中表达水AP 中的表达水平要高于 PC3 和 DU145 中的表达。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3095565