miR-590-3p靶向调控TFAM对膀胱癌的抑制作用及其相关机制的研究

发布时间：2021-04-13 01:09

　　目的：miRNA在基因调控中起着关键作用,同样线粒体转录因子A （TFAM）是线粒体DNA的复制和转录过程中的必要因素。但是两者之间的关系及其在膀胱癌中的作用并不明确。本研究旨在阐明miR-590-3p和TFAM对膀胱癌的作用并探讨其分子机制。方法：1、采用Real-time PCR检测miR590-3p和West-Blot检测TFAM在正常组织、癌旁组织及不同分期的膀胱癌组织中的表达情况。2、采用双荧光素酶报告基因系统验证miR-590-3p与TFAM之间的调控关系。3、构建miR-590-3p过表达慢病毒载体和TFAM过表达质粒载体4、采用MTT法、流式细胞检测法、TransWell法等常用方法对慢病毒感染和质粒转染的人膀胱癌细胞进行实验,从细胞生长、细胞周期、侵袭能力、克隆形成的方面来检测miR-590-3p靶向调控TFAM对膀胱癌生物学行为的影响。5、用Western-Blot方法来检测转染了miR-590-3p过表达慢病毒和TFAM过表达质粒的膀胱癌5637细胞中PI3K/、p-PI3K、AKT、 p-AKT、MMP-2、MMP-9等因子的表达情况,来初步探寻其两者的调控信号... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：105 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

RNA提取电泳图

以p<0.05时具有统计学意义。同时依照均值绘制柱状图。其中Normal正常组织；Tumor adjcent为癌旁组织；T1为膀胱癌T1期；T2a为膀胱癌T2a期T2b为膀胱癌T2b期。2.2.3.2 Real-time PCR 反应结果曲线如下（见阁 2-2、2-3、2-4、2-5)

我们从以上各幅图中看到，扩增曲线结果显示，与阴性对照U6相比无信号，S型曲线平滑；而溶点曲线结果显示，目标曲线无杂峰。所以我光定量PCR反应中目的基因miR-590-3p得到了有效的扩增，且扩增产，所得实验结果可信。.3.3 miR590-3P在不同组织标本中的表达如下（见图2-6):


本文编号：3134330