miR-506-3p通过靶向MTDH增加前列腺癌细胞的化学敏感性

发布时间：2021-04-16 03:11

　　目的研究miR-506-3p对前列腺癌细胞化学敏感性的影响及其作用机制。方法用RT-qPCR检测miR-506-3p和MTDH在前列腺癌细胞系和正常前列腺细胞系中的表达水平;以紫杉醇为诱导药物构建人前列腺癌耐药细胞株PC-3/PTX,将PC-3/PTX细胞随机分为5组:对照组、NC mimic组、miR-506-3p mimic组、LV-MTDH组、mimic+MTDH组,利用Lipofectamine 3000转染试剂盒分别转染对应质粒。检测其存活率、IC50值、克隆细胞数目、凋亡率以及凋亡相关蛋白的表达水平;构建MTDH野生型（WT）和突变型（MUT）,用双荧光素酶报告基因实验验证miR-506-3p与MTDH之间的靶向关系; Western blot检测miR-506-3p mimic处理后PC-3/PTX细胞中MTDH的蛋白表达水平。结果 miR-506-3p在前列腺癌细胞中低表达,而MTDH高表达; miR-506-3p在PC-3/PTX细胞中的表达量显著低于在前列腺癌细胞PC-3中的表达量;相比于对照组和NC mimic组,miR-506-3p mimic组的PC-3/PT... 

【文章来源】：局解手术学杂志. 2020,29(05)

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

RT-qPCR检测miR-506-3p与MTDH在前列腺癌细胞中的表达

用TargetScan软件预测，发现在MTDH 3"UTR的978-985 bp区域存在has-miR-506-3p的潜在结合位点(图4a)。用双荧光素酶报告基因实验验证，MTDH野生型较突变型能使荧光素酶活性显著下降(图4b)，说明miR-506-3p与MTDH之间确实存在靶向关系。Western blot检测发现miR-506-3p mimic组PC-3/PTX细胞中MTDH蛋白表达水平显著低于对照组和NC mimic组(图4c)，表明过表达miR-506-3p会抑制MTDH的表达，即miR-506-3p靶向抑制MTDH的表达。图3 miR-506-3p过表达促进前列腺癌耐药细胞PC-3/PTX凋亡

图2 miR-506-3p过表达抑制前列腺癌耐药细胞PC-3/PTX生长2.5 miR-506-3p通过靶向抑制MTDH的表达增强PC-3/PTX细胞的化学敏感性

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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本文编号：3140623