microRNA-26a-5p通过下调TRPC6减少糖尿病肾病足细胞凋亡

发布时间：2021-04-17 22:07

　　目的通过构建2型糖尿病（T2DM）动物模型及高糖刺激体外培养足细胞,测定T2DM大鼠模型肾组织、体外培养足细胞中microRNA-26a-5p（miR-26a-5p）、nephrin、瞬时受体电位阳离子通道蛋白6（TRPC6）及凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3和bax/bcl-2的表达水平和足细胞凋亡情况,并应用miR-26a-5p mimics、inhibitor转染高糖刺激体外培养的足细胞,观察上述指标的变化,探讨miR-26a-5p对TRPC6介导的糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）足细胞损伤的作用及其可能机制,为DN足细胞的保护提供新的临床思路和治疗靶点。方法体内实验选取30只SPF级、雄性Wistar大鼠,随机分为两组,其中20只用于构建T2DM大鼠模型,具体方法为采用高糖高脂喂养并联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素（streptozotocin,STZ,30 mg/kg）,另设正常对照组（NC组）10只。对于建模达到要求的大鼠留取血、尿及肾脏标本,测定两组大鼠24小时尿白蛋白排泄率（UAE）、尿肌酐（Ucr）、内生肌酐清除率（CCr）、空腹... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

B、C分别为两组大鼠KW/BW、CCr和UAE的比较

结果151.3光镜下两组大鼠的肾脏病理表现光镜下，HE染色及PAS染色显示，NC组大鼠肾小球结构未见明显异常，毛细血管管腔等显示清晰，无明显闭塞，系膜细胞及基质未见增生，基底膜无明显增厚。而较NC组相比，DM组大鼠肾组织肾小球体积明显增大，毛细血管襻扩张，肾小球系膜细胞增生，基底膜增厚。如图2（A-D）。NC组T2DM组图2两组大鼠光镜下肾脏结构病理改变。A、B:HE染色（×400）；C、D:PAS染色（×400）1.4电镜下足细胞超微结构改变电子显微镜下NC组大鼠足突排列整齐清晰，基底膜未见明显增厚，足细胞整体结构的完整性良好（如图3A）；而DM组大鼠足突排列紊乱，足突融合率较正常组明显升高[(74.70±3.55)%vs.(4.26±1.19)%，P<0.05，图3B、图4]，肾小球基底膜不同程度弥漫性增厚。

青岛大学硕士学位论文16NC组T2DM组图3两组大鼠足细胞电镜超微结构改变（透射电镜，×8000）图4两组大鼠足突融合率。*P＜0.05vsNC组1.5两组大鼠肾脏免疫组化结果图5A、B可见，NC组大鼠肾组织nephrin基本呈连续线性分布在肾小球，而DM组大鼠nephrin表达明显降低，染色强度明显减弱，积分平均值明显减少（P<0.05，如图5E）；但免疫组化结果显示TRPC6在DM组大鼠肾脏表达及积分平均值较NC组明显增多，如图5C、D、F。

【参考文献】：
期刊论文
[1]他克莫司对2型糖尿病大鼠足细胞氧化应激的影响[J]. 武国华,马瑞霞,张伟,王彤,孙益婷.  中华肾脏病杂志. 2016 (04)
[2]他克莫司通过减少肾小球足细胞凋亡降低2型糖尿病大鼠尿白蛋白[J]. 马瑞霞,李作林,宋起,武国华,徐岩.  中华高血压杂志. 2016(03)
[3]他克莫司对2型糖尿病大鼠足细胞凋亡的保护作用[J]. 李作林,马瑞霞,朱月华,徐岩,王彤.  中华肾脏病杂志. 2015 (10)
[4]足细胞损伤的诱导途径:血管紧张素Ⅱ-足细胞瞬时受体电位阳离子通道蛋白6信号通路[J]. 姚丹丹,马瑞霞,翟丽慧,李作林,李臻.  中国组织工程研究. 2014(46)
[5]MicroRNA-21在自身免疫性疾病中的调节作用与机制[J]. 董利阳,汪雪峰,苏川.  细胞与分子免疫学杂志. 2013(09)
[6]微小RNA异常与系统性红斑狼疮研究新进展[J]. 马斌,汪国生.  中华风湿病学杂志. 2013 (06)
[7]微小RNA（microRNA）与免疫细胞分化及功能调节[J]. 刘乔飞,杨荣存.  中国免疫学杂志. 2010(06)



本文编号：3144213