基因表达谱芯片技术筛选肾癌细胞OS-RC-2骨转移相关基因

发布时间：2021-04-18 23:37

　　目的建立肾癌细胞OS-RC-2骨转移动物模型，获得病灶肿瘤细胞株，并对两组细胞间的基因表达谱进行对比分析，筛选差异表达基因。方法通过胫骨平台向胫骨髓腔内注射OS-RC-2细胞，待局部成瘤后取病灶肿瘤细胞，循环注射，最后获得的肿瘤细胞株与OS-RC-2细胞之间分别以MTT法检测增殖能力，Transwell法检测侵袭能力，流式细胞技术检测细胞周期变化。提取两组细胞的mRNA，通过基因芯片技术进行杂交扫描和分析，结合KEGG网站数据库的信号通路分析，筛选出相关基因，并以RT-PCR及Western blot法分别验证筛选出的基因在mRNA及蛋白水平上的表达差异。结果建立肾癌骨转移动物模型，获得高骨转移能力细胞株OS-RC-2-BM-3，基因芯片扫描得到差异基因共1196个，其中上调基因926个，下调基因270个，根据KEGG数据库筛选出HIF-1α及HSP90，RT-PCR结果及Western结果均与基因芯片扫描符合。结论肾癌细胞OS-RC-2骨转移与多个基因相关，其中HIF-1α及HSP90可能起到关键作用。 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

成瘤的裸鼠

裸鼠下肢u-CT扫描三维成像

图.3 a 图为取材之后第二天的倒置相差b 图为反复贴壁法后分离纯化得到c 图为 OS-RC-2祖细胞。0.500.550.600.650.700.750.800.850.900.951.001.051.10ODOO

【参考文献】：
期刊论文
[1]HSP90在肿瘤中的研究[J]. 胡秀娟,王雪峰.  医学综述. 2008(01)



本文编号：3146384