SENP1对肾血管球发育的调控及其在后肾发育中的表达

发布时间：2021-04-19 08:50

　　目的:探讨小泛素化特异性蛋白酶（SENP1）对肾血管球发育的调控,研究SENP1在后肾发育中的表达规律。方法:随机取孕鼠,分别收集E13.5d、E14.5d、E16.5d、E18.5d胚胎小鼠的肾脏,及Pld、P7d、P14d、P21d、P28d幼年小鼠肾脏,利用RT-PCR技术测定目的基因SENP1各时间点的表达,观察mRNA随肾脏发育的变化规律;利用Western Blot技术测定目的蛋白SENP1、HIF-2α各时间点的表达,观察蛋白表达随肾脏发育的变化规律;利用免疫组化、免疫荧光技术,定位目的蛋白的表达部位,观察其随着肾脏发育的变化规律。结果:随着小鼠胚胎肾脏发育成熟,SENP1mRNA稳定表达（p>0.05）;随着小鼠胚胎肾脏发育成熟,SENP1蛋白表达逐渐减低（p<0.05）,HIF-2α蛋白表达逐渐减低（p<0.05）,两者变化趋势基本一致;但免疫荧光、免疫组化定位SENP1未得到阳性结果。结论:随着小鼠胚胎肾脏发育成熟,SENP1、HIF-2α出现较为一致的变化规律,说明SENP1、HIF-2α和肾脏发育具有一定时间相关性,提示SENP1对于小鼠胚胎肾... 

【文章来源】：大连医科大学辽宁省

【文章页数】：41 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料和方法
    1. 材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验试剂
        1.3 主要仪器
        1.4 其他材料
    2. 方法
        2.1 实验动物处理及标本留取
        2.2 胚肾组织RNA提取和cDNA合成
        2.3 扩增cDNA片段,目的基因SENP1,凝胶成像
        2.4 冰冻切片免疫荧光染色
        2.5 石蜡切片免疫组化染色（ABC法）
        2.6 胚肾蛋白Western Blot
实验结果
    1.RT-PCR检测SENP1 mRNA在胚肾发育各时间点的表达情况
    2. Western Blot检测目的基因SENP1在胚肾发育各个时间点的表达情况
    3.利用VVestcrn Ulot检测目的基因HIF-2α在胚肾发育各个时间点的表达情况
    4. 使用免疫组化,检测目的基因的蛋白表达及定位
    5. 使用免疫荧光,检测目的基因的蛋白表达及定位
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号：3147235