糖尿病肾病中CREB/miR-22/DDIT4通路促进肾小管上皮细胞DNA损伤的实验研究

发布时间：2021-05-16 02:49

　　目的:DNA损伤和糖尿病肾病发生发展密切相关,但具体机制尚不明确,本研究旨在探究CREB/miR-22/DDIT4通路在糖尿病肾病中促进肾小管上皮细胞DNA损伤的具体机制,以期进一步阐明糖尿病肾病的发病机制,为防治DN寻找新的有效靶点。方法:（1）用C57BL小鼠建立糖尿病肾病模型,16周后处死,分析其生化指标并对肾脏组织做HE染色观察,通过western blot技术检测肾脏组织中的ATM磷酸化水平、Chk2磷酸化水平和DDIT4、p-CREB的蛋白表达水平。（2）分别用高糖培养基和正常糖培养基培养肾小管上皮细胞（NRK-52E）细胞,通过彗星实验检测DNA双链断裂程度,通过细胞流式技术检测细胞周期的影响,通过western blot技术检测细胞中的ATM磷酸化水平、Chk2磷酸化水平和DDIT4、CREB磷酸化水平。（3）构建DDIT4过表达质粒,转染质粒后通过彗星实验检测过表达DDIT4对DNA双链断裂的影响,通过western blot技术检测细胞中的ATM磷酸化水平、Chk2磷酸化水平和DDIT4的蛋白表达水平。（4）通过miRanda和TargetScan预测miR-22对... 

【文章来源】：贵州医科大学贵州省

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

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