前列腺癌骨转移蛋白质组学研究及CD59在骨转移过程中表达上调的机制探讨
发布时间：2021-06-11 07:55
目的:1.筛选前列腺癌伴骨转移患者的血清差异蛋白,并对关键差异蛋白进行验证。2.分别建立前列腺癌细胞PC3与人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）及成骨细胞（hFOB1.19）的共培养体系,研究PC3细胞与hBMSCs及hFOB1.19细胞之间的相互影响及CD59表达变化的机制。方法:1.收集前列腺癌伴骨转移和无转移患者的血清各30例,采用iTRAQ蛋白质组学方法比较两组患者的血清差异蛋白。2.收集前列腺癌伴骨转移、前列腺癌无转移及前列腺增生患者血清样本各50例及三组患者的前列腺组织切片各30张,另收集前列腺癌骨转移灶切片5张,采用ELISA和免疫组化对3个具有显著变化倍数的关键差异蛋白进行验证。3.用Western blot、流式细胞术和免疫荧光分析三种关键差异蛋白在前列腺癌细胞株PC3、LNCaP、DU145中的表达情况。4.分别建立PC3细胞与hBMSCs及hFOB1.19细胞的共培养体系,研究hBMSCs及hFOB1.19对PC3的增殖、迁移和侵袭能力的影响及PC3对hFOB1.19增殖能力的影响。5.通过流式细胞周期检测、Western blot、RT-PCR及细胞免疫荧光分析各...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：121 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－３前列腺癌及前列腺増生组织光密度值分析示意图（１０ｘ４０）??Ｆｉｇ．?１－３?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｉｎ?ｐｒｏｓｔａｔｅ?ｃａｎｃｅｒ?ａｎｄ?ｂｅｎｉｇｎ?ｐｒｏｓｔａｔｉｃ?ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ?（１０ｘ４０）??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]C57BL/6小鼠前列腺癌种植瘤模型的建立及新药的用药方式比较和药效评价[J]. 王媛媛,林明明,朱晴,田亚云,慕晓琦,延春雨,刘峰. 当代医学. 2019(01)
[2]肿瘤细胞周期测定方法研究[J]. 高世勇,谢明宏,谭慧心,李丹,李琳,吴爽,安娜. 药物评价研究. 2018(08)
[3]肿瘤患者来源的异种移植（PDX）模型[J]. 师长宏. 实验动物与比较医学. 2018(03)
[4]经股动脉注射途径建立前列腺癌和乳腺癌骨转移模型[J]. 殷昭阳,齐思勇,成祥,郭靓,陈泓宇,施明. 南方医科大学学报. 2017(07)
[5]小鼠不同部位体内前列腺癌骨转移模型的建立及方法改进[J]. 毕永祥,肖民辉,张宁南,李晓云,毛晓鹏,张科,章卓睿,赵良运. 北京大学学报(医学版). 2017(04)
[6]18F-NaF PET-CT显像技术辅助下的前列腺癌骨转移动物模型建立[J]. 尤强,蔡华伟,庞富文,王哲涛,陈跃,田蓉,李林,陈利弘. 四川大学学报(医学版). 2017(02)
[7]免疫缺陷大、小鼠在肿瘤学研究中的应用及实验中常见问题分析[J]. 田枫,张阔,郑振辉. 中国免疫学杂志. 2016(02)
[8]人体肿瘤PDX移植模型的优与劣[J]. 胡斌权,陈城明,张同弟,李天,师长宏. 实验动物科学. 2015(05)
[9]Skeletal metastasis:treatments,mouse models,and the Wnt signaling[J]. Kenneth C.Valkenburg,Matthew R.Steensma,Bart O.Williams,Zhendong Zhong. Chinese Journal of Cancer. 2013(07)
[10]三种常见的前列腺癌细胞系LNCap、PC3和DU145的生物学特性[J]. 林艳端,申锷,胡兵. 中华临床医师杂志(电子版). 2013(11)
博士论文
[1]前列腺癌中RANK/RANKL/OPG的表达与前列腺癌侵袭及骨转移的关系[D]. 李晓鸣.兰州大学 2010
[2]骨保护素在前列腺癌骨转移中作用的基础与临床研究[D]. 陈海昕.中国协和医科大学 2007
硕士论文
[1]慢性心理应激通过β2-AR/AKT/PKA信号通路对前列腺癌骨转移影响的研究[D]. 齐思勇.中国人民解放军医学院 2017
[2]脐血造血干细胞移植NOD/SCID小鼠后人免疫功能重建的研究[D]. 谭玉波.暨南大学 2006
[3]CXCR4在非小细胞肺癌细胞中的表达和意义[D]. 李醒.重庆医科大学 2006
本文编号：3224157
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：121 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－３前列腺癌及前列腺増生组织光密度值分析示意图（１０ｘ４０）??Ｆｉｇ．?１－３?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｉｎ?ｐｒｏｓｔａｔｅ?ｃａｎｃｅｒ?ａｎｄ?ｂｅｎｉｇｎ?ｐｒｏｓｔａｔｉｃ?ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ?（１０ｘ４０）??
?区域。四连接素在腺上皮及间质均有表达，故将腺上皮和间质区域分别分析。??光密度分析示意图如图１－２和１－３所示。??１＇：．?＊＿＃＃ｋ??图１－２前列腺癌骨转移灶光密度值分析示意图（１０ｘ４０）??Ｆｉｇ?１－２?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｏｆ?ｂｏｎｅ?ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ?ｆｒｏｍ?ｐｒｏｓｔａｔｅ?ｃａｎｃｅｒ?（１０ｘ４０）??骨转移灶内除骨组织外，均为密集的前列腺癌上皮细胞，无明显间质，故将整个转移??瘤组织圈选，然后通过软件自动计算平均光密度值。右图红色区域代表软件自动识别的染??色阳性的细胞。??＇ｗｍＳｆ??＞?ｊｌ?ｒ?＊?＇?Ａ?－１??图１－３前列腺癌及前列腺増生组织光密度值分析示意图（１０ｘ４０）??Ｆｉｇ．?１－３?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｉｎ?ｐｒｏｓｔａｔｅ?ｃａｎｃｅｒ?ａｎｄ?ｂｅｎｉｇｎ?ｐｒｏｓｔａｔｉｃ?ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ?（１０ｘ４０）??左图所示为圈选前列腺组织上皮所在区域为感兴趣区域，右图红色区域代表软件自动??识别的染色阳性的细胞，然后通过软件自动计算平均光密度值。??１３??
??图１－８?ＣＤ５９、触珠蛋白和四连接素免疫组化分析??Ｆｉｇ．?１－８?Ｃｏｎｆｉｒｍａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＣＤ５９，?ｈａｐｔｏｇｌｏｂｉｎ，?ａｎｄ?ｔｅｔｒａｎｅｃｔｉｎ?ｂｙ??ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ?ａｎａｌｙｓｉｓ??绿色箭头指示前列腺癌或前列腺增生组织的上皮细胞，蓝色箭头在图Ａ）和Ｉ）指示骨??组织，在其他图片中指示前列腺间质。所有图片放大４００倍。??？０２＝?Ａ＾?ｉ？０４?Ｂ?—???？〇４?＾?叩版ｌｉｕｍ?１〇３?＼?Ｄ?…５ｌｒｏｍａ??５：貧卜曆卜醉??ｙｉｔ?ｅＩｄｌ?ｅＩｌ?ｔｍ??／／／，ｗ＇／／，?／／／，?／?／，??图１－９前列腺癌和增生组织中ＣＤ５９、结合珠蛋白和四连接素的平均光密度值比较??Ｆｉｇ．?１－９?Ｔｈｅ?ｍｅａｎ?ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｏｆ?ＣＤ５９，?ｈａｐｔｏｇｌｏｂｉｎ?ａｎｄ?ｔｅｔｒａｎｅｃｔｉｎ?ｉｎ?ｐｒｏｓｔａｔｅ?ｃａｎｃｅｒ?ａｎｄ??ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ?ｔｉｓｓｕｅｓ．??ＢＭＴ：骨转移瘤；ＰＣａＢＭ：伴骨转移的前列腺癌组织；ＰＣａＮＭ：无转移的前列腺癌组??织；ＰＨ：前列腺增生组织。＊代表ｐ＜０．０５
【参考文献】：
期刊论文
[1]C57BL/6小鼠前列腺癌种植瘤模型的建立及新药的用药方式比较和药效评价[J]. 王媛媛,林明明,朱晴,田亚云,慕晓琦,延春雨,刘峰. 当代医学. 2019(01)
[2]肿瘤细胞周期测定方法研究[J]. 高世勇,谢明宏,谭慧心,李丹,李琳,吴爽,安娜. 药物评价研究. 2018(08)
[3]肿瘤患者来源的异种移植（PDX）模型[J]. 师长宏. 实验动物与比较医学. 2018(03)
[4]经股动脉注射途径建立前列腺癌和乳腺癌骨转移模型[J]. 殷昭阳,齐思勇,成祥,郭靓,陈泓宇,施明. 南方医科大学学报. 2017(07)
[5]小鼠不同部位体内前列腺癌骨转移模型的建立及方法改进[J]. 毕永祥,肖民辉,张宁南,李晓云,毛晓鹏,张科,章卓睿,赵良运. 北京大学学报(医学版). 2017(04)
[6]18F-NaF PET-CT显像技术辅助下的前列腺癌骨转移动物模型建立[J]. 尤强,蔡华伟,庞富文,王哲涛,陈跃,田蓉,李林,陈利弘. 四川大学学报(医学版). 2017(02)
[7]免疫缺陷大、小鼠在肿瘤学研究中的应用及实验中常见问题分析[J]. 田枫,张阔,郑振辉. 中国免疫学杂志. 2016(02)
[8]人体肿瘤PDX移植模型的优与劣[J]. 胡斌权,陈城明,张同弟,李天,师长宏. 实验动物科学. 2015(05)
[9]Skeletal metastasis:treatments,mouse models,and the Wnt signaling[J]. Kenneth C.Valkenburg,Matthew R.Steensma,Bart O.Williams,Zhendong Zhong. Chinese Journal of Cancer. 2013(07)
[10]三种常见的前列腺癌细胞系LNCap、PC3和DU145的生物学特性[J]. 林艳端,申锷,胡兵. 中华临床医师杂志(电子版). 2013(11)
博士论文
[1]前列腺癌中RANK/RANKL/OPG的表达与前列腺癌侵袭及骨转移的关系[D]. 李晓鸣.兰州大学 2010
[2]骨保护素在前列腺癌骨转移中作用的基础与临床研究[D]. 陈海昕.中国协和医科大学 2007
硕士论文
[1]慢性心理应激通过β2-AR/AKT/PKA信号通路对前列腺癌骨转移影响的研究[D]. 齐思勇.中国人民解放军医学院 2017
[2]脐血造血干细胞移植NOD/SCID小鼠后人免疫功能重建的研究[D]. 谭玉波.暨南大学 2006
[3]CXCR4在非小细胞肺癌细胞中的表达和意义[D]. 李醒.重庆医科大学 2006
本文编号：3224157
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