膀胱癌5637细胞系中CD133阳性细胞亚群的分离及生物学行为研究

发布时间：2021-06-16 22:44

　　目的：研究人膀胱癌5637细胞系CD133阳性细胞中的分离方法以及CD133细胞的体外增殖、分化、自我更新及迁徙能力，初步探讨膀胱癌中CD133阳性细胞亚群的干细胞特性。方法：流式细胞仪检测膀胱癌5637细胞中CD133阳性细胞表达情况；免疫磁珠分选技术纯化CD133阳性肿瘤细胞，流式细胞仪检测免疫磁珠发分选的纯度；MTT法检测CD133阳性细胞体外增殖能力；平板实验检测其克隆能力；划痕实验检测其体外迁徙能力，流式细胞仪检测其分化能力。结果：1、流式细胞仪检测CD133阳性细胞在膀胱癌5637细胞中比例为1.45%。2、经免疫磁珠法分离、流式细胞仪检测，CD133⁺细胞纯度高达93.42%。3、MTT实验、平板实验、划痕实验结果显示CD133⁺细胞增殖克隆能力及迁徙能力较CD133^-细胞有明显差异。4、分化潜能测定：CD133⁺细胞体外培养1周，分别在第2、4、6天利用流式细胞仪检测CD133⁺细胞的比例，培养至第2天，CD133⁺细胞的比例由原来的98%... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：40 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

流式细胞仪检测细胞系中CD133+亚群的比例，提示CD133+细胞在细胞系中的比例为1.45%

未分选膀胱癌 5637 细胞系中 CD133+表达率为 1.45%(图 3.1)，分选后CD133+细胞表达率为 93.42%(图三)，二组间差异有统计学意义(P<0.05)。免疫磁珠技术是目前肿瘤干细胞可靠的分选方法，苔盼蓝拒染实验表明，免疫磁珠法分选所得肿瘤细胞活力好，可直接进行下一步实验。利用免疫磁珠分选技术（图 4.1、4.2）纯化膀胱癌 5637 细胞系中 CD133阳细胞，分选前流式细胞仪检测 CD133+细胞的百分比为 1.45%;分选后，流式细胞仪检测 CD133+细胞群的百分比为 93.42%（如图 4.3），达到了试验的目的及后续试验的纯度要求。

免疫磁珠细胞分选示意图

【参考文献】：
期刊论文
[1]肿瘤干细胞理论及肿瘤干细胞分离和鉴定研究进展[J]. 宋东颖,王毅,孙岚,张英鸽.  中国药理学与毒理学杂志. 2012(05)
[2]膀胱癌细胞株T24中侧群细胞的分离和功能鉴定[J]. 宁志丰,江春,许可慰,黄海,尹心宝,黄健.  中华实验外科杂志. 2010 (03)
[3]实体肿瘤干细胞分离鉴定技术的研究进展[J]. 刘平平,李晓明.  西南军医. 2009(03)



本文编号：3233930