piR-hsa-1282在急性肾损伤中的作用及机制研究

发布时间：2021-07-10 04:29

　　目的piRNA作为非编码小RNA（small non-coding RNA,sncRNA）家族的一员,参与基因表达调控。piRNAs在组织损伤中作用已有广泛研究,但piRNAs在急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）中的作用尚未报道。本文旨在检测piR-hsa-1282在AKI患者血清标本和脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导人肾小管上皮细胞HK-2和人胚肾细胞293T急性损伤中的表达,探讨piR-hsa-1282参与急性肾损伤发展的作用机制。同时检测不同急性肾损伤小鼠模型中piR-mmu-36656450（piR-hsa-1282的小鼠同源性序列）表达情况,并分析其表达水平与肾损伤程度的相关性,揭示piR-hsa-1282/piR-mmu-36656450作为诊断标志物的潜在价值,为临床治疗急性肾损伤提供新靶点。方法建立piR-hsa-1282/piR-mmu-36656450的实时荧光定量RT-PCR（quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR）... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

piRNA的形成途径[42]

江 苏 大 学 硕 士 学 位 论 文melting curve of piR-mmu-36656450; (C) piR-mmu-36656450 sequencing.3.3.2 piR-hsa-1282/piR-mmu-36656450 在 AKI 中的表达qRT-PCR检测临床AKI患者血清中的piR-hsa-1282的表达情况，检测结果显示，与健康人相比，piR-hsa-1282在AKI患者血清中表达上调(图3.6A)。同时在AKI动物模型中检测表明，CLP-AKI组中piR-mmu-36656450的表达明显高于假手术组(图3.6B)。piR-mmu-36656450在顺铂诱导急性肾损伤小鼠模型中具有相同的表达趋势(图3.6B)。

HE切片结果显示，随着术后时间越长，小鼠肾小管空泡坏死越严重(图3.7A)。免疫荧光检测cleaved caspase3在术后24h表达量最高(图3.7B)。血清BUN和Cre水平也呈现时间依赖性升高(图3.7C)。qRT-PCR结果表明CLP组小鼠的piR-mmu-36656450表达逐渐上调,并且在24h有40倍率的改变(图3.7D)。图3.7 CLP AKI小鼠动态模型构建和piR-mmu-36656450的表达检测（A）HE染色检测小鼠肾脏损伤程度：a:sham组，b:CLP 6h组,c:CLP 12h组,d:CLP 24h组（放大倍数：×200，标尺=50 μm）；(B)免疫荧光检测CLP小鼠不同时间点cleaved caspase3的表达；(C)不同时间点的CLP小鼠血清BUN、Cre水平(*P<0.05); (D)qRT-PCR检测不同时间点CLP小鼠肾脏组织中piR-mmu-36656450的表达(*P<0.05)；


本文编号：3275189