血管内皮细胞通过诱导ERG表达促进前列腺癌耐药

发布时间：2021-08-02 23:42

　　目的:探讨血管内皮细胞对前列腺癌细胞耐药能力的影响,并进一步研究血管内皮细胞作用于前列腺癌细胞的可能的分子机制。方法:1.利用Transwell小室构建共培养体系,通过CCK-8和Annexin V-FITC/PI检测细胞耐药的能力并通过蛋白印迹法（WB）检测凋亡相关分子的表达;2.利用聚合酶链式反应（PCR）及WB检测共培养后前列腺癌细胞中成红细胞病毒E26致癌物（ERG）的表达情况;利用酶联免疫吸附实验（ELISA）筛选出共培养组与非共培养组细胞上清之间有差异的细胞因子,并通过WB检测各个细胞因子与ERG的关系,确定影响ERG表达最明显的细胞因子。结果:1.前列腺癌细胞与血管内皮细胞共培养后,前列腺癌细胞对多西他赛的耐药性增加,细胞凋亡减少;2.共培养后前列腺癌细胞ERG的表达增高;血管内皮细胞分泌的成纤维细胞生长因子2（FGF2）在共培养后有明显增加,FGF2可以促进前列腺癌ERG的表达,并且这种病效应会被FGF2的抑制剂所逆转。结论:血管内皮细胞分泌的FGF2可促进前列腺癌细胞ERG的表达,促进前列腺癌细胞对多西他赛的耐药性。 

【文章来源】：现代生物医学进展. 2020,20(04)

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

血管内皮细胞促进前列腺癌细胞耐药。（A）细胞活力实验检测22Rv1与血管内皮细胞共培养后细胞耐药能力的变化；（B）血管内皮细胞抑制多西他赛引起的22Rv1细胞的凋亡；（C)Western blot分析不同凋亡相关蛋白表达。（*P<0.05;**P<0.01)

图1 血管内皮细胞促进前列腺癌细胞耐药。（A）细胞活力实验检测22Rv1与血管内皮细胞共培养后细胞耐药能力的变化；（B）血管内皮细胞抑制多西他赛引起的22Rv1细胞的凋亡；（C)Western blot分析不同凋亡相关蛋白表达。（*P<0.05;**P<0.01)2.3 FGF2是共培养后内皮细胞分泌的关键细胞因子

下面我们试图确定在与HUVEC共培养后，究竟是哪些因素影响了前列腺癌细胞ERG的表达。我们的前期研究表明，IL-6,IL-8,CCL-5和FGF2在共培养后有明显的上调[12,13]，我们又利用ELISA进一证实了内皮细胞与前列腺癌共培养后的条件培养基中FGF2的浓度明显高于内皮细胞单独培养的。为了验证FGF2是否可以引起前列腺癌细胞ERG的过表达，我们通过在22Rv1的培养基中加入不同浓度的FGF2,48小时后抽提蛋白，western blot结果发现FGF2处理前列腺癌后其ERG的表达显著增加，且对着FGF2浓度的增加而增加（图15）。PD173074是一种有效的FGFR1抑制剂，可以剂量依赖的方式抑制FGF2[16]。通过在共培养体系中加入PD173074，我们发现实PD173074可以减少内皮细胞对前列腺癌细胞耐药性的影响。以上结果表明，FGF2可能是通过旁分泌的方式促进了前列腺癌ERG的过表达，进而在促进肿瘤化疗耐药中发挥重要的作用。3 讨论


本文编号：3318497