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H19靶向miR-130-5p调控自然杀伤细胞对前列腺癌细胞的杀伤作用

发布时间:2021-08-12 07:04
  目的探讨H19调控自然杀伤(NK)细胞对前列腺癌(PC)细胞的杀伤作用及其机制。方法将si-NC、si-H19、pcDNA3.1、pcDNA3.1-H19、miR-NC、miR-130-5p、anti-miR-NC、anti-miR-130-5p质粒载体分别转染至正常培养的PC细胞中;将si-NC,si-H19、miR-NC、miR-130-5p质粒载体分别转染至PC-3细胞与NK细胞共培养的细胞中;将si-H19分别与anti-miR-NC、anti-miR-130-5p质粒载体共转染至PC-3细胞与NK细胞共培养的细胞中;转染均采用脂质体法。噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测干扰素(IFN)-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平;qRT-PCR检测miR-130-5p和H19 mRNA的表达水平;Western印迹检测白细胞抗原(HLA)-G蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果 PC细胞中H19高表达,miR-130-5p低表达。干扰H19表达和过表达miR-130-5p均抑制与NK细胞共培养的PC-3细胞的存活,抑制HLA-G... 

【文章来源】:中国老年学杂志. 2020,40(24)北大核心

【文章页数】:6 页

【部分图文】:

H19靶向miR-130-5p调控自然杀伤细胞对前列腺癌细胞的杀伤作用


抑制H19对HLA-G蛋白表达的影响

序列,序列,NK细胞,细胞


miR-NC组比较,miR-130-5p组PC-3细胞与NK细胞共培养后miR-130-5p的表达水平显著升高(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-130-5p组PC-3细胞与NK细胞共培养后对PC-3细胞存活率显著降低(P<0.05)。miR-NC组比较,miR-130-5p组PC-3细胞与NK细胞共培养后NK细胞中IFN-γ、TNF-α的表达水平显著升高(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-130-5p组PC-3细胞HLA-G蛋白的表达水显著降低(P<0.05)。见图3,表4。表3 双荧光素酶报告实验 ( x ˉ ±s,n=3) 组别 WT-H19 MUT-H19 miR-NC组 1.01±0.07 1.03±0.08 miR-130-5p组 0.34±0.02 0.98±0.06 t/P值 15.940/0.000 0.866/0.435

过表达,NK细胞,蛋白,细胞


表3 双荧光素酶报告实验 ( x ˉ ±s,n=3) 组别 WT-H19 MUT-H19 miR-NC组 1.01±0.07 1.03±0.08 miR-130-5p组 0.34±0.02 0.98±0.06 t/P值 15.940/0.000 0.866/0.4352.5 抑制miR-130-5p表达的PC-3细胞与NK细胞共培养后能逆转干扰H19增强NK细胞对PC-3细胞的杀伤作用

【参考文献】:
期刊论文
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博士论文
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本文编号:3337839

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