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大黄素体外诱导人肾透明细胞癌细胞株786-0凋亡效应及相关通路的实验研究

发布时间:2021-08-20 21:13
  目的:研究大黄素体外诱导人肾透明细胞癌细胞株786-0的凋亡作用,并初步探讨其诱导肾透明细胞癌细胞凋亡的可能分子机制,旨在为大黄素在抗人肾透明细胞癌方面的临床应用提供实验依据,增加对其药理作用及量效时效关系的深入认识。方法:(1)将同代的人肾透明细胞癌细胞株786-0分组,分为空白对照组,阴性对照组以及药物作用组(分别为10、20、40、60和80μmol/L组)。(2)普通光学显微镜观察细胞增殖抑制及HE细胞染色观察。(3)采用DAPI染色进行细胞凋亡形态学改变检测。(4)采用CCK法观察大黄素作用下肾癌细胞的增殖抑制率。(5)利用RT-PCR技术从mRNA水平研究bax、bcl-2的表达差异。(6)利用Western-Blot技术在蛋白水平研究bax、bcl-2的表达差异。(7)采用JC-1探针法明确786-0细胞内线粒体跨膜电位的改变。(8)通过caspase-9、 caspase-3活性试剂盒检测caspase-9、caspase-3上调水平。结果:倒置显微镜下观察,随着大黄素作用浓度的增加和作用时间的延长,786-0细胞形态逐渐变圆或者不规则,胞内空泡增多,部分细胞脱壁并漂浮... 

【文章来源】:福建医科大学福建省

【文章页数】:51 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
英文缩略语对照表
摘要
Abstract
前言
材料与方法
    1. 材料
    2. 方法
实验结果
    3.1 不同浓度的大黄素对786-0细胞形态的影响
    3.2 不同浓度的大黄素对 786-0 细胞核的影响
    3.3 不同浓度的大黄素对786-0细胞生长抑制率的影响
    3.4 RT-PCR检测不同浓度作用下细胞Bcl-2 ,Bax的mRNA表达
    3.5 Western-blo检测不同浓度作用下细胞Bcl-2 ,Bax的蛋白表达
    3.6 JC-1 法检测 786-0 细胞内线粒体跨膜电位的改变
    3.7 不同浓度的大黄素对786-0细胞caspase-9,caspase-3相对活性的影响
讨论
结论
参考文献
致谢
综述
    参考文献


【参考文献】:
期刊论文
[1]索拉非尼治疗晚期肾癌患者33例长期临床观察[J]. 杨琳,丁英俊,石磊,于世英.  疑难病杂志. 2012(10)
[2]大黄素增强吉西他滨对裸鼠SW1990细胞移植瘤的抑瘤作用[J]. 魏为添,郭亚飞,陈辉,刘殿雷,郭洪春,林胜璋.  中国中药杂志. 2010(24)
[3]索拉非尼治疗转移性肾癌的临床研究[J]. 周爱萍,何志嵩,于世英,张沂平,杜春霞,孙永昆,石远凯,王金万,那彦群,孙燕.  中华泌尿外科杂志. 2009 (01)
[4]Nuclear factor-kB p65 (RelA) transcription factor is constitutively activated in human colorectal carcinoma tissue[J]. Liang-Liang Yu Jie-Ping Yu He-Sheng Luo Xi-Ming Xu Jun-Hua Li Department of Gastroenterology,Renmin Hospital,Wuhan University,Wuhan 430060,Hubei Province,China Hong-Gang Yu,Laboratory for Experimental Gastroenterology,Department of Medicine I,St.Joseph Hospital,Ruhr-University Bochum,Bochum,Germany.  World Journal of Gastroenterology. 2004(22)
[5]大黄素抑制人高转移巨细胞肺癌PG细胞的肿瘤转移相关性质[J]. 王心华,甄永苏.  癌症. 2001(08)



本文编号:3354239

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