活性维生素D3调控炎症信号通路对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及机制的研究

发布时间：2021-08-25 16:52

　　[目的]1.探讨活性维生素D3调控NF-kB炎症信号通路对2型糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及机制;2.寻找维生素D在治疗糖尿病肾病中的最佳浓度。[方法]将SD大鼠60只随机分成正常对照组（10只）、DKD模型组（50只）,且DKD模型组据处理方式分为:花生油组、厄贝沙坦组、维生素D低剂量组、维生素D中剂量组、维生素D高剂量组,每组各10只。正常组以普通饲料喂养,模型组分别以上述处理方式进行灌胃。6周后处死大鼠并称取体重,分离血清检测空腹血糖（FPG）,甘油三脂（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）、胰岛素（INS）、C肽（CP）,收集24小时尿液计算尿量、测24h尿蛋白定量（uPro）;留取肾脏组织,HE染色观察肾组织病理学变化;实时荧光定量PCR检测肾脏组织中NF-kB及其下游单核细胞趋化因子（MCP-1）的mRNA的表达;Western booting检测炎症因子NF-kB及MCP-1蛋白的表达。组间两两比较采用独立样本t检验,等级资料秩和检验。[结果]（1）在血糖、24h 尿蛋白、TG、LDL-c 水平,维生素 D 低剂量组（18.20±5.95、32.24±... 

【文章来源】：昆明医科大学云南省

【文章页数】：89 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

空腹胰岛素水平标准曲线

（６）ＢＣＡ法测定蛋白浓度标准曲线：（图４）??ＳｔａｎｃａｒｄＣｕｒｖＧ??｜?￣＾??＼?Ｚ??Ｉ??０．３５??ｚ，??°－１５〇?２?４?６?８?１丨３??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ??？?５ｉＴｎｆｌ１?（?＾ｔａｎｆｉ？ｒｒｌ５＠Ｐｒｎｒｐｉｎｆ＼ｉｉａｎｔ＿Ｒｒ．Ａ?？?Ｍ＾ａｎＤｎ?ｗ？?Ｓｔａｎｒｉａｒｒ?）??ｆｕｎ／ｐ?Ｆｉｔ?Ｒｐ＾ｕｌｔ＊：?Ａ??Ｃｕｒｖｅ?Ｆｉｔ：?Ｌｉｎｅａｒ?－?Ａ－ｒ?Ｂｘ??ＰａｒａｉＴｉｅｔｅｒ?Ｅｓｔｉｍａｔｅｄ?＼＾ｌｕｅ?Ｓｔｄ．?Ｅｒｒｏｒ?Ｃｏｎｆｉｄｅｎａ?Ｉｎｔｅｒ／ａｌ??ＳＴＵ０１?Ａ?０．１６９?０．００５?［ａｉ５５，０．１８２］??ｆｐ－?＝?０．９９Ｓ??Ｅ．?０．０５０?９．２９Ｓ－４?［￡１０４８，０．０５３】??图４?ＢＣＡ法测定蛋白浓度标准曲线??２．６．２?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ检测肾脏样本中蛋白表达量??１．?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?凝胶电泳??（１）

２．?ＲＮＡ完整性检测??１％琼脂糖凝胶电泳，ＴＡＥ电泳缓冲液中，１５０ｖ，电泳２５ｍｉｎ，检测ＲＮＡ的??完整性。（见图５）??正１?花１?厄１?ＶＤｌ?ＶＺｌ?ＶＧｌ｜?正２?花２?厄２?ＶＤ２?ＶＺＺ?ＶＧ２）正３?花３?厄３?ＶＤ３?ＶＺ３?ＶＧ３?丨卜：４?花４?厄４?ＶＤ４?ＶＺ４?ＶＧ４??２８Ｓ?Ｉ?叫??１８Ｓ｜?，?＇?Ｉ??５ｓ?Ｉ?＾?：ｒ‘，＇Ｉ??图５各样本ＲＮＡ完整性检测??２．７．３逆转录步骤??１．按照下表的基因组ＤＮＡ的去除体系配制混合液，彻底混匀。简短离心，并??置于４２°Ｃ，孵育３?ｍｉｎ。然后置于冰上放置。（表９）??２７??

【参考文献】：
期刊论文
[1]厄贝沙坦通过核转录因子κB信号通路减轻高糖诱导的H9C2细胞炎症反应及凋亡的研究[J]. 雷梅先,王云开,王琦,曹原.  中国糖尿病杂志. 2017(07)
[2]2型糖尿病合并慢性肾脏病患者的肾脏病理与临床表现特点[J]. 司美君,叶增纯,赵文波,张笑浩,李吟,刘迅,彭晖,娄探奇.  中华肾脏病杂志. 2016 (06)
[3]维生素D与糖尿病肾病[J]. 刘燕,戴武.  安徽医学. 2015(12)
[4]活性维生素D3灌胃治疗大鼠糖尿病肾病的效果及其作用机制[J]. 徐园园,魏迎凤,卢学超,解其华,翟林云.  山东医药. 2016(03)
[5]JNK信号通路与糖尿病肾病的研究进展[J]. 闫婧,于为民,任小军.  国际泌尿系统杂志. 2015 (05)
[6]维生素D受体基因多态性在慢性肾脏病中的研究进展[J]. 李静静,司晓芸.  医学综述. 2015(11)
[7]维生素D与2型糖尿病关系的研究进展[J]. 孙衍,王彦,夏新霞,贺娅莎.  世界最新医学信息文摘. 2015(15)
[8]维生素D与慢性肾脏病的研究进展[J]. 权志慧,夏成云.  国际泌尿系统杂志. 2015 (03)
[9]糖尿病肾病大鼠模型建立的比较[J]. 邢冬杰,宿世震,陈桂玉,王金凤,曲英杰.  辽宁中医药大学学报. 2014(09)
[10]维生素D与糖尿病肾病相关性研究进展[J]. 王亚娟,任建民,肖晓燕,韩峰.  中国实用内科杂志. 2014(07)



本文编号：3362497