抑癌因子PKC-ζ对前列腺癌细胞生长及侵袭/迁移的调节和机制初探

发布时间：2021-09-01 07:45

　　研究背景与目的前列腺癌（PCa）的发病率在全球的男性肿瘤中高居第二位,而我国的前列腺癌发病率增长较快,因此,对前列腺癌的研究及防治十分重视。前列腺癌细胞的代谢明显异于其他肿瘤细胞代谢,而前列腺肿瘤的发生发展与其代谢重编程的潜在机制,目前认识尚不足。目前研究显示PKC-ζ在黑色素瘤、乳腺癌中促进肿瘤进展,而在肺癌、结肠癌扮演抑制肿瘤进展的角色,PKC-ζ在不同肿瘤进展中扮演着双重角色。PKC-ζ是否参与调控前列腺癌细胞的代谢,影响乳酸的生成,进而影响前列腺癌的生长及进展,关于这方面知之甚少。本研究旨在探讨前列腺癌PKC-ζ的表达与其分级分期的相关关系,通过构建过表达PKC-ζ的前列腺癌细胞株,对其进行全转录本测序分析,研究其引起的相关通路变化,调控代谢重编程,进而影响肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移等功能,并探讨潜在的分子机制,旨为前列腺癌治疗提供新策略和新靶点。研究内容与方法1.分析TCGA的前列腺癌组织PKC-ζ的表达与其分级分期的相关关系、表达的PKC-ζ与代谢基因的相关关系并对过表达PKC-ζ的前列腺癌细胞转录本测序及相关通路分析。1.1获取TCGA数据分析前列腺癌组织PKC-ζ的表达... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１．前列腺癌ＰＫＣ＜的表达与其分级分期的相关关系??

通过ＰＫＣ－ｉ；的慢病毒（０Ｅ组）和对照组（ＣＴＬ组）感染前列腺癌细胞ＰＣ－３??和ＤＵ－１４５，含有嘌呤霉素的培养基进行选择性培养，若慢病毒成功感染前列腺??癌细胞，载有ＧＦＰ慢病毒的可激发产生绿色荧光，结果如图１－２Ａ所示。证实载??有ＰＫＣ－（的慢病毒和对照慢病毒成功感染前列腺细胞，为了验证０Ｅ组和ＣＴＬ??组的ＰＫＣ－；；ｍＲＮＡ和蛋白的表达量，结果如图１－２Ｂ所示，前列腺癌细胞ＰＣ－３??的ＰＫＣｆＯＥ组的蛋白水平较ＣＴＬ组明显增加（ｐ＜０．０１），前列腺癌细胞ＰＣ－３??中０Ｅ组的ｍＲＮＡ表达明显增加（ｐ＜０．０１）。结果如图１－２Ｃ所示，在前列腺癌??细胞ＤＵ－１４５中０Ｅ组的表达蛋白含量较ＣＴＬ组明显增加（ｐ＜０．０１），在０Ｅ组??中ＤＵ－１４５的ＰＫＣ；的ｍＲＮＡ表达比ＣＴＬ组明显增加（ｐ＜０．０１），以上结果说??明ＰＫＣ－《过表达效果可行，具有明显特异性。??Ａ?ＣＴＬ?ＯＥ??ＤＵ－１４５?＾?令??图１－２．前列腺癌细胞株ＰＫＣ－纟稳定表达的筛选和鉴定??Ｆｉｇｕｒｅ

相关分子功能的作用、细胞所处的微环境有关的信号通路。通过ＧＯ数据库对差??异表达基因进行统计分析，获得ＧＯ条目中差异基因富集的显著性的Ｐ值，Ｐ值??越小表示富集程度越显著。根据ＧＯ分析的结果如图１－３Ａ，其中提示可能影响??通路：血管生成、对前列腺癌细胞的迁移、生长呈负相关、划痕实验、氨基酸??转运、对凋亡、间质转化呈正相关影响等通路。在氨基酸转运的通路中，发现??部分氨基酸转运蛋白的ｍＲＮＡ表达上调，结果如图１－３Ｂ所示，上调最明显为芳??香族氨基酸相关转运蛋白基因（ＳＬＣ１６Ａ１０）。结合ＴＣＧＡ数据进一步挖掘前列腺??癌组织表达ＰＫＣ（与其他转运蛋白代的关系。??ＫＥＧＧ数据库整合最新肿瘤研宄的内容，包含肿瘤细胞信号通路、药理机??制、人类疾病、基因和基因组等数据。通过ＫＥＧＧ数据库统计分析得出Ｐ值，??其Ｐ值越小说明相关基因在该通路中富集的程度越显著，根据ＫＥＧＧ的通路分??析提示，结果如图１－３Ａ，差异表达基因富集程度显著且有重要意义的通路分别??为Ｐ５３信号通路、肾上腺素信号通路、ＦｏｘＯ信号通路、精氨酸生物合成、丙氨??酸、天冬氨酸、谷氨酸等氨基酸代谢、ＭＡＰＫ信号通路、蛋白吸收和消化等通??路。在相关氨基酸代谢的通路中，发现ＰＫＣ－Ｃ过表达的前列腺癌细胞中精氨酸??琥珀酸合成酶１?（ＡＳＳ１）、天冬酰胺酶（ＡＳＮＳ）的ｍＲＮＡ表达明显上调


本文编号：3376572