JAML在糖尿病肾病足细胞脂质代谢稳态失衡中的作用及机制
发布时间：2021-09-30 09:18
足细胞是一种高度分化的肾小球上皮细胞,是维持肾小球滤过屏障结构和功能正常的重要组成部分。足细胞损伤是导致糖尿病肾病（diabetic kidney disease,DKD）、局灶性节段性肾小球硬化症（focal segmental glomurular sclerosis,FSGS）、膜性肾病（membranousnephropathy,MN）和微小病变肾病（Minimal-changedisease,MCD）等肾小球疾病的重要原因。尽管目前对于足细胞损伤的机制研究取得了一定的进展,但在临床治疗中仍然缺乏特异性的有效策略。越来越多的研究表明,肾脏足细胞区域内脂代谢稳态失衡是导致糖尿病肾病等肾小球疾病发生发展的主要机制,并已成为目前本领域的研究热点。JAML（junctional adhesion molecule-like protein,Amical,连接粘附分子样蛋白）是JAMs家族中新发现的一个成员,属于分泌性的I型跨膜糖蛋白。以往研究表明JAML主要分布于各种固有免疫和适应性免疫细胞中,在免疫、炎症和组织稳态中发挥重要作用。近期发现,它在内皮细胞和上皮细胞中也有表达,当细胞受损...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：229 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１：?ＪＡＭＬ蛋白结构示意图??
?山东大学博士学位论文???实验结果??１?临床病人血清和肾组织标本检测ＪＡＭＬ的表达情况??１．１糖尿病肾病患者血清中ＪＡＭＬ表达情况??ＥＬＩＳＡ实验检测正常健康人与糖尿病肾病患者血清中ＪＡＭＬ的表达水平，??结果显示ＪＡＭＬ在糖尿病肾病患者血清中显著升高（图１）。??＾?８０?－Ｉ?＊??Ｉ，?＾４－１??Ｓ?６０?－?＾??＾?４０?－?ｒＴ．??Ｅ??ｉ?２０?■??ｃｏ??０?Ｊ?１?１???Ｎｏｒｍａｌ?ＤＫＤ??图１糖尿病肾病患者血清中ＪＡＭＬ表达变化??ＥＬＩＳＡ结果显示，糖尿病肾病患者（ｎ＝９）与正常健康人血清（ｎ＝１６）相比，血??清中ＪＡＭＬ表达明显升高。＊表示与正常健康人相比，Ｐ＜０．０５。??１．２糖尿病肾病患者肾活检样本中ＪＡＭＬ变化及相关性分析??糖尿病肾病患者（ＤＫＤ，病理学分型ＩＩ型？ＩＶ型）肾穿刺活检标本病理切片??进行免疫组化染色，于光学显微镜下观察，并统计肾小球中阳性染色率，发现与??对照组（肾脏癌旁正常组织）相比，轻度（ｃｌａｓｓＩＩ）、中度（ｃｌａｓｓＩＩＩ）、重度（ｃｌａｓｓ??ＩＶ）糖尿病肾病患者肾活检样本中ＪＡＭＬ均在肾小球中显著增加，并可能与糖??尿病肾病损伤程度相关（图２Ａ）。??１．３糖尿病肾病患者肾活检样本中ＪＡＭＬ变化??肾小球疾病患者肾活检样本免疫组化染色，光学显微镜下拍摄，半定量分析??结果显示，ＪＡＭＬ在局灶性节段性肾小球硬化症、膜性肾病和微小病变肾病的肾??小球中显著增加（图２Ｂ）。??１．４肾小球疾病患者肾活检样本中ＪＡＭＬ表达与血肌酐、肾小球滤过率ｅＧＦＲ??和蛋白尿相关性分析??５０??
ＧＦＲ??（Ｓｐｅａｒｍａｎ?ｒ＝－０．６９２３，尸＜０．０１，ｎ＝４１）负相关，Ｅ：相关性分析发现患者的肾小球??中ＪＡＭＬ表达水平与尿蛋白无相关性（Ｓｐｅａｒｍａｎｒ＝丨７００，／＊＞０．０５，?ｎ＝２７）。??１．糖尿病肾病动物模型中ＪＡＭＬ表达变化情况??１．１?２型糖尿病肾病小鼠模型办／％小鼠血清中ＪＡＭＬ表达变化??自发性２型糖尿病办小鼠，对照组为杂合子办／／ｗ小鼠，小鼠２０周??龄取材。血清ＥＬＩＳＡ检测结果显示，模型小鼠血清中ＪＡＭＬ含量与Ｗｗ??小鼠相比显著升高（图３）。??２００?１??｜?＊??ｇ?１５０?－?ｒ１１１－??」??ｆ?１００?—?ｔ－??Ｉ?５０??（Ｓ?一??０?—??ｄｂ／ｍ?ｄｂ／ｄｂ??图３?ｄｂ／ｄｂ小鼠血清中ＪＡＭＬ表达变化??ＥＬＩＳＡ结果显示办／办糖尿病肾病小鼠血清中ＪＡＭＬ水平明显升高。＊表示与??组相比，尸＜０．０５?（ｎ＝７）。??１．２?２型糖尿病肾病小鼠模型小鼠肾皮质中ＪＡＭＬ表达变化??通过ＲＴ－ｑＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ检测发现，与Ｗｗ小鼠相比，办／办小鼠??肾皮质中ＪＡＭＬ?ｍＲＮＡ?（图４Ａ）及蛋白水平（图４Ｂ）均显著升高。免疫组化??染色结果显示，说＞以６小鼠肾小球中ＪＡＭＬ表达显著升高，而肾小管中ＪＡＭＬ??无显著变化（图４Ｃ）。??１．３免疫荧光检测ＪＡＭＬ在２型糖尿病肾病小鼠模型小鼠足细胞中表??达变化??通过免疫荧光实验对办／ｍ、Ｗ办小鼠肾脏石蜡切片进行ＪＡＭＬ与足细??胞标记蛋白Ｓｙｎａｐｔｏｐｏｄｉｎ焚光双染，激光共聚焦拍摄结果显示ＪＡＭＬ在办／办??５２??
【参考文献】：
期刊论文
[1]大黄酸增加2型糖尿病大鼠肾组织SIRT1的表达[J]. 陈卫东,常保超,张燕,杨萍,刘磊. 细胞与分子免疫学杂志. 2015(05)
博士论文
[1]Sirt6在糖尿病肾病足细胞损伤中的保护作用及机制研究[D]. 刘敏.山东大学 2017
硕士论文
[1]连接粘附分子样蛋白JAML在急性肾损伤中的作用[D]. 王碧欧.山东大学 2017
本文编号：3415568
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：229 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１：?ＪＡＭＬ蛋白结构示意图??
?山东大学博士学位论文???实验结果??１?临床病人血清和肾组织标本检测ＪＡＭＬ的表达情况??１．１糖尿病肾病患者血清中ＪＡＭＬ表达情况??ＥＬＩＳＡ实验检测正常健康人与糖尿病肾病患者血清中ＪＡＭＬ的表达水平，??结果显示ＪＡＭＬ在糖尿病肾病患者血清中显著升高（图１）。??＾?８０?－Ｉ?＊??Ｉ，?＾４－１??Ｓ?６０?－?＾??＾?４０?－?ｒＴ．??Ｅ??ｉ?２０?■??ｃｏ??０?Ｊ?１?１???Ｎｏｒｍａｌ?ＤＫＤ??图１糖尿病肾病患者血清中ＪＡＭＬ表达变化??ＥＬＩＳＡ结果显示，糖尿病肾病患者（ｎ＝９）与正常健康人血清（ｎ＝１６）相比，血??清中ＪＡＭＬ表达明显升高。＊表示与正常健康人相比，Ｐ＜０．０５。??１．２糖尿病肾病患者肾活检样本中ＪＡＭＬ变化及相关性分析??糖尿病肾病患者（ＤＫＤ，病理学分型ＩＩ型？ＩＶ型）肾穿刺活检标本病理切片??进行免疫组化染色，于光学显微镜下观察，并统计肾小球中阳性染色率，发现与??对照组（肾脏癌旁正常组织）相比，轻度（ｃｌａｓｓＩＩ）、中度（ｃｌａｓｓＩＩＩ）、重度（ｃｌａｓｓ??ＩＶ）糖尿病肾病患者肾活检样本中ＪＡＭＬ均在肾小球中显著增加，并可能与糖??尿病肾病损伤程度相关（图２Ａ）。??１．３糖尿病肾病患者肾活检样本中ＪＡＭＬ变化??肾小球疾病患者肾活检样本免疫组化染色，光学显微镜下拍摄，半定量分析??结果显示，ＪＡＭＬ在局灶性节段性肾小球硬化症、膜性肾病和微小病变肾病的肾??小球中显著增加（图２Ｂ）。??１．４肾小球疾病患者肾活检样本中ＪＡＭＬ表达与血肌酐、肾小球滤过率ｅＧＦＲ??和蛋白尿相关性分析??５０??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]大黄酸增加2型糖尿病大鼠肾组织SIRT1的表达[J]. 陈卫东,常保超,张燕,杨萍,刘磊. 细胞与分子免疫学杂志. 2015(05)
博士论文
[1]Sirt6在糖尿病肾病足细胞损伤中的保护作用及机制研究[D]. 刘敏.山东大学 2017
硕士论文
[1]连接粘附分子样蛋白JAML在急性肾损伤中的作用[D]. 王碧欧.山东大学 2017
本文编号：3415568
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