miRNA-210在肾透明细胞癌中表达的研究
发布时间:2021-10-08 15:28
目的1)探索肾透明细胞癌中是否存在差异表达的miRNA表达谱。2)探索miR-210在细胞活力,细胞凋亡,细胞周期,迁移和侵袭中的作用。3)探索miR-210下调后对HIF1α蛋白的表达有何影响。方法1)对9例配对的肾透明细胞癌(ccRCC)及其癌旁正常肾组织,采用TaqMan探针的低密度阵列芯片技术,对其相关特异性microRNAs进行分析,并对miR-210进行进一步的定量RT-PCR验证。2)使用miR-210抑制剂在CAKI-2和ACHN细胞株中下调miR-210,并设立阴性对照组,以评估miR-210在细胞活力,细胞凋亡,细胞周期,迁移和侵袭中的作用。3)进行western blot实验,检测miR-210下调后HIF1α蛋白表达的变化。结果1)用TaqMan探针的低密度阵列对9例ccRCC配对标本进行分析发现:78个miRNAs在肾癌及相应癌旁组织中差异表达,且大多数miRNAs表现出下降的趋势,其中73个在肾癌中表达下降,仅5个表达上调。进一步对35例肾癌组织及10例正常肾实质进行定量RT-PCR验证miR-210在肾癌中高表达。2)ACHN及CAKI-2肾细胞系转染mi...
【文章来源】:南京大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:51 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图2转染24小时后转染组和对照组miRNA-210表达量??
细胞系转染组较对照组,细胞活性下降了?24.1?%±3.3?%?(n=3,?P<0.0005);??CAKI-2细胞系转染组较对照组,细胞活性下降了?28.4?%±5.4?%(n=3,?POO.O(H)。??(见附图3)??i?.?p-?-|?r— ̄ ̄-1??i??i:?2?I??::I.圍?L」??ACHN?CAKI-2??附图3转染48小时后转染组及对照组细胞活性比较??15??
ACHN和CAKI2细胞株转染后温育48小时,随后用满化丙旋染色,并用流??式细胞仪分析,结果得出:CAKI2细胞株中,大量细胞停留在S期,G2期细??胞比例减少(P=0.02,n=3,见附图4);而对于ACHN细胞株,细胞周期未见明??显差异性改变。??娜!?■<?恥恥1??!??—1??t?宇.?II?二.?I??—i?,??i^i?I??^?te-?I??mock?anti-miR-210??附图4转染48小时后两组CAKI2细胞株细胞周期变化的比较??16??
【参考文献】:
期刊论文
[1]miRNA-142-5p在肾细胞癌中高表达的研究[J]. 赵爽,王海峰,刘凌琪,辛殿祺. 山东医药. 2008(41)
本文编号:3424442
【文章来源】:南京大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:51 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图2转染24小时后转染组和对照组miRNA-210表达量??
细胞系转染组较对照组,细胞活性下降了?24.1?%±3.3?%?(n=3,?P<0.0005);??CAKI-2细胞系转染组较对照组,细胞活性下降了?28.4?%±5.4?%(n=3,?POO.O(H)。??(见附图3)??i?.?p-?-|?r— ̄ ̄-1??i??i:?2?I??::I.圍?L」??ACHN?CAKI-2??附图3转染48小时后转染组及对照组细胞活性比较??15??
ACHN和CAKI2细胞株转染后温育48小时,随后用满化丙旋染色,并用流??式细胞仪分析,结果得出:CAKI2细胞株中,大量细胞停留在S期,G2期细??胞比例减少(P=0.02,n=3,见附图4);而对于ACHN细胞株,细胞周期未见明??显差异性改变。??娜!?■<?恥恥1??!??—1??t?宇.?II?二.?I??—i?,??i^i?I??^?te-?I??mock?anti-miR-210??附图4转染48小时后两组CAKI2细胞株细胞周期变化的比较??16??
【参考文献】:
期刊论文
[1]miRNA-142-5p在肾细胞癌中高表达的研究[J]. 赵爽,王海峰,刘凌琪,辛殿祺. 山东医药. 2008(41)
本文编号:3424442
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