纳米羟基磷灰石通过溶酶体-线粒体通路诱导肾小管上皮细胞的凋亡机制

发布时间：2021-10-13 00:36

　　目的探索纳米羟基磷灰石（HAP）对肾小管上皮细胞（HK-2细胞）凋亡的影响及其机制。方法将不同浓度的（0、5、10、20、40、80μg/mL）的HAP作用于HK-2细胞,使用MTT、活细胞/死细胞染色检测HAP对HK-2细胞增殖的影响。以0、10、20、40μg/mL的HAP作用HK-2细胞6、24 h,用流式细胞仪检测细胞的凋亡及坏死情况。HAP（40μg/mL）作用于HK-2细胞6 h,用激光共聚焦显微镜观察HAP在细胞内的分布。以0、10、20、40μg/mL的HAP作用HK-2细胞6 h,用酶标仪检测过氧化氢（H2O2）水平和加入抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）后HK-2细胞活性的改变,用流式细胞仪检测活性氧（ROS）、线粒体膜电位（Δψm）、caspase-3水平。结果 HAP可明显的抑制HK-2细胞的增殖,且呈浓度-时间依赖性。HAP诱导细胞内ROS升高、线粒体膜电位（Δψm）降低、溶酶体完整性破坏、caspase-3水平增加,从而导致细胞凋亡。结论 HAP通过溶酶体和线粒体途径诱导HK-2细胞凋亡,并呈浓度依赖性。 

【文章来源】：实用医学杂志. 2020,36(12)北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要试剂
    1.2 实验方法
        1.2.1 HAP的合成和表征
        1.2.2 细胞培养
        1.2.3 HK-2细胞存活率和活细胞/死细胞染色检测
        1.2.4 HK-2细胞凋亡测定
        1.2.5 HAP在HK-2细胞内分布
        1.2.6 ROS的检测
        1.2.7 溶酶体完整性检测
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 HAP表征
    2.2 HAP对的HK-2细胞存活率影响
    2.3 HAP引起的HK-2细胞调亡
    2.4 HAP在HK-2细胞中的分布
    2.5 HAP诱导HK-2细胞ROS的释放
    2.6 HAP对HK-2细胞溶酶体膜完整性的影响
    2.7 HAP对HK-2细胞线粒体功能的影响
    2.8 caspase-3的释放
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3433615