Piwil2及Stat3、Bcl-2蛋白在雄性不育小鼠睾丸中表达及相关性研究
发布时间:2021-10-15 07:14
目的:本研究通过建立小鼠不育模型,检测Piwil2蛋白及Stat3、Bcl-2蛋白在雄性不育小鼠睾丸组织中的表达状况,及探讨三者表达之间存在的潜在位置及量的相关性;并进一步阐明Piwil2蛋白在不育发生发展中的作用及相关机制。方法:取雄性昆明种小鼠60只,随机分为实验组与对照组,每组30只。实验组小鼠采用雷公藤多苷药物造小鼠不育模型。每天对小鼠进行雷公藤多苷混悬液灌胃,剂量按照小鼠体重以0.001 ml/g进行,每天一次,持续28 d。对照组小鼠使用生理盐水进行灌胃,剂量、及持续时间与实验组一致。造模后将两组雄性小鼠分别与雌性小鼠交配,观察雌性小鼠的受孕状况;一周后再将雄性小鼠处死,分别取出两组小鼠的双侧睾丸组织及附睾。对两组小鼠的附睾分别进行精子计数;分别采用免疫组织化学染色法和蛋白印迹检测法来以分别检测两侧睾丸组织样本中Piwil2、Stat3及Bcl-2蛋白的表达状况,并采用定量PCR方法检测三种蛋白在睾丸组织中的mRNA的表达水平。将实验组与对照组的检测结果进行比较,观察两组的蛋白表达的差异性及三种蛋白表达的相关性。结果:1.H.E染色结果显示,对照组小鼠睾丸组织结构发育正常,...
【文章来源】:青岛大学山东省
【文章页数】:52 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 引言
第二章 材料与方法
2.1.试剂与耗材
2.1.1 使用试剂
2.1.2 使用耗材
2.2.实验仪器
2.3.实验方法
2.3.1 技术路线
2.3.2 实验动物
2.3.3 实验方法
2.3.4 苏木素伊红染色(H.E染色)
2.3.5 免疫组织化学染色(IHC染色)
2.3.6 蛋白印迹法(Western Blot)
2.3.7 定量PCR
2.4.统计分析
第三章 结果
3.1.小鼠体重及附睾精子计数
3.2.H.E染色及造模结果分析
3.3.IHC染色结果分析
3.4.Western Blot结果分析
3.5.定量PCR结果分析
第四章 讨论
4.1 Piwil2蛋白在精子生成过程中的作用
4.2 Stat3及Bcl-2蛋白在精子生成过程中的作用
4.3 在调节精子生成过程中Piwil2与Stat3、Bcl-2蛋白可能存在潜在正相关性
第五章 结论
参考文献
综述
综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表(附录)
致谢
本文编号:3437647
【文章来源】:青岛大学山东省
【文章页数】:52 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 引言
第二章 材料与方法
2.1.试剂与耗材
2.1.1 使用试剂
2.1.2 使用耗材
2.2.实验仪器
2.3.实验方法
2.3.1 技术路线
2.3.2 实验动物
2.3.3 实验方法
2.3.4 苏木素伊红染色(H.E染色)
2.3.5 免疫组织化学染色(IHC染色)
2.3.6 蛋白印迹法(Western Blot)
2.3.7 定量PCR
2.4.统计分析
第三章 结果
3.1.小鼠体重及附睾精子计数
3.2.H.E染色及造模结果分析
3.3.IHC染色结果分析
3.4.Western Blot结果分析
3.5.定量PCR结果分析
第四章 讨论
4.1 Piwil2蛋白在精子生成过程中的作用
4.2 Stat3及Bcl-2蛋白在精子生成过程中的作用
4.3 在调节精子生成过程中Piwil2与Stat3、Bcl-2蛋白可能存在潜在正相关性
第五章 结论
参考文献
综述
综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
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本文编号:3437647
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