下调N-乙酰氨基葡萄糖转移酶-V对前列腺癌细胞放射治疗和激素治疗敏感性的影响

发布时间：2021-10-24 10:27

　　一、研究背景前列腺癌是发生在男性中最常见的恶性肿瘤之一,并且随着年龄的增长,其发病率越来越高。据报道,在20世纪80年代晚期以及90年代早期,美国新诊断的前列腺癌病例已超过肺癌作为男性中发病率最高的的肿瘤疾病[1]。目前,前列腺癌的常见治疗方法包括：根治性的手术、放疗、内分泌治疗、化疗等。放射治疗作为传统治疗手段之一,广泛应用于不同分期的前列腺癌：早期前列腺癌的放射治疗可以达到根治的目的,效果与根治性手术相似；局部晚期前列腺癌采取放疗结合内分泌治疗可提高存活率[2]；有远处转移者,姑息放疗可以缓解局部症状,改善生活质量。但临床发现部分病人因放疗抵抗导致放疗后局部复发,预后不佳[3]。提高放射剂量可以减低肿瘤局部复发率,但是高剂量放疗伴随的副反应,如肠道损伤、泌尿系统受损、性功能障碍等,却严重影响患者的生活质量[4]。此外,内分泌治疗是晚期前列腺癌姑息治疗的主要方法,虽然最初可获得很高的有效率,但是相当一部分病人在治疗2-5年后病情进展为激素抵抗性前列腺癌（HRPC）,最终导致治疗失败。长时间内分泌治疗诱导肿瘤细胞产生激素抵抗性的同时,对放射治疗的耐受性同样得到提高[5]。因此,如何提高... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：93 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 前言
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞株
        2.1.2 质粒
        2.1.3 主要试剂及耗材
        2.1.4 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养与转染
        2.2.2 RT-PCR测定GnT-V mRNA
        2.2.3 Western blot检测蛋白表达
        2.2.4 平板克隆实验检测细胞克隆形成率
        2.2.5 CCK-8检测细胞增殖性
        2.2.6 划痕实验检测细胞迁移能力
        2.2.7 Hoechst 33258核染色及流式细胞术检测细胞凋亡
        2.2.8 比色分析法测定Caspase-3活性
        2.2.9 流式细胞术检测细胞周期
        2.2.10 双荧光素酶实验检测细胞信号通路2.2.10.1实验分组
        2.2.11 皮下成瘤实验
        2.2.12 免疫组化检测种植瘤切片GnT-V、Bcl-2、Bcl-xl、Bax表达情况(切片制作)
        2.2.13 统计学分析
第三章 结果
    3.1 重组质粒的稳定转染
    3.2 干扰效果检测
    3.3 GnT-V shRNA对放疗前后细胞克隆形成的影响
    3.4 CCK-8法测定GnT-V shRNA对放疗后细胞增殖能力变化
    3.5 划痕实验检测GnT-V shRNA对Lncap细胞照射前后迁移能力改变
    3.6 Hoechst 33258核染色及流式细胞术检测GnT-V shRNA对Lncap细胞照射前后凋亡改变
    3.7 比色分析法检测GnT-V shRNA对细胞放疗后Caspase-3活性的影响
    3.8 流式细胞术检测GnT-V shRNA对Lncap细胞照射前后周期改变
    3.9 双荧光素酶实验检测GnT-V shRNA对PCa细胞照射前后NF-kB信号通路改变
    3.10 GnT-V shRNA对裸鼠皮下成瘤实验的影响
    3.11 生存曲线
    3.12 Western blot检测GnT-V shRNA对Lncap细胞照射前后相关凋亡蛋白的改变
    3.13 CCK-8法测定GnT-V shRNA对激素治疗后PCa细胞增殖能力变化
    3.14 Western blot检测GnT-V shRNA对PCa细胞氟他胺作用前后相关凋亡蛋白的改变
    3.15 双荧光素酶实验检测GnT-V shRNA对PCa细胞氟他胺作用前后WNT信号通路表达的改变
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
致谢



本文编号：3455117