FFA上调AMPK/Vimentin促进前列腺癌细胞PC-3的增殖、侵袭和迁移

发布时间：2021-11-19 07:19

　　目的探讨游离脂肪酸（Free Fatty Acid,FFA）对人前列腺癌细胞PC-3生物学行为的影响及可能机制。方法1. 5mmol/L FFA混合液（油酸∶棕榈酸=2∶1）刺激体外培养的PC-3细胞,CCK-8法检测对细胞的毒性作用,流式细胞仪检测对增殖的影响,Transwell法检测对侵袭、迁移的影响。细胞转染和RNA干扰技术上/下调AMPK。qRT-PCR技术检测AMPK、Vimentin及VEGF的mRNA表达水平。Western Blot检测蛋白表达水平。结果 （1）1. 5 mmol/L FFA混合液处理48h后,PC-3细胞的增殖、侵袭和迁移能力均显著增强（P<0. 05）,细胞内AMPK、Vimentin及VEGF的mRNA表达显著升高（P<0. 05）。（2） 1. 5 mmol/L FFA混合液作用于PC-3细胞的同时下调AMPK,PC-3细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著降低（P<0. 05）,Vimentin的mRNA表达显著降低（P<0. 05）。（3）上调AMPK表达48 h后,PC-3细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著增强（P<0. ... 

【文章来源】：石河子大学学报(自然科学版). 2020,38(02)北大核心

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

FFA混合液对PC-3细胞生物学行为以及AMPK、Vimentin和VEGF表达的影响

Transwell实验结果显示，与FFA单纯干预组相比，PC-3细胞的侵袭和迁移能力显著降低(P<0.01)(图2B)。qRT-PCR结果显示:与FFA单纯干预组相比，PC-3细胞中Vimentin的表达显著降低(P<0.01)(图2C)。2.3 AMPK可通过调控Vimentin的表达，促进PC-3细胞的增殖、侵袭和迁移

细胞周期实验结果显示:过表达AMPK后处于G0/G1期的PC-3细胞数目显著降低，而处于S期的PC-3细胞数目显著增加(P<0.05)(图3C)。Transwell实验结果显示:与对照组相比，PC-3细胞的侵袭和迁移能力均显著增加(P<0.01)(图3D)。qRT-PCR结果显示:过表达AMPK可显著促进PC-3细胞Vimentin的表达，而抑制VEGF的表达(P<0.01)(图3E)。转染si-AMPK 24 h后，与对照组相比，PC-3细胞内AMPK的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)，提示下调AMPK模型构建成功，可用于后续实验(图4A、图4B)。细胞周期实验结果表明:与对照组相比，下调AMPK后处于G0/G1期的PC-3细胞数目显著增加，而处于S期和G2/M期的PC-3细胞数目显著降低(P<0.05)(图4C)。


本文编号：3504554