负载骨髓MSCs和/或EPCs的羊膜支架修复犬长段尿道缺损的研究

发布时间：2021-11-20 22:36

　　目前,长段尿道缺损是尿道疾病治疗中的难题,虽然组织工程研究领域的快速发展给尿道缺损的再生修复带来了希望,但如何促进组织和血管新生仍然是一个瓶颈问题。为探究该问题的解决办法。我们采用冻融-十二烷基硫酸钠-核酸酶的方法对人羊膜进行脱细胞,获得羊膜脱细胞基质支架（decellularized Human Amniotic Scaffold,dHAS）,并在dHAS上种植骨髓MSCs（Bone Mesenchymal Stem Cells,BMSCs）和内皮祖细胞（Endo thelial Progenitor Cells,EPCs）,通过HE染色和扫描电镜检测羊膜的脱细胞情况及dHAS与细胞的相容性。最后选用25只健康的杂种成年犬,建立3 cm长尿道缺损模型,分别采用负载BMSCs和EPCs（BMSCs+EPCs组）、EPCs（EPCs组）、BMSCs（BMSCs组）的dHAS桥接修复缺损,并设dHAS修复组（dHAS组）和不修复组（缺损组）作对照。术后通过观察犬排尿情况,4周和8周后的尿道造影,2月后的剖检和样品的组织学观察,评估再生尿道缺损修复和塑型效果。研究结果如下:1.羊膜细胞成分完... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：42 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 尿道缺损修复方法的研究进展
    1.1 雄性尿道的解剖结构
    1.2 尿道缺损的修复方法
        1.2.1 端端吻合术修复方法
        1.2.2 替代物修补法
            1.2.2.1 皮瓣修补法
            1.2.2.2 口腔黏膜修补法
        1.2.3 组织工程修复法
            1.2.3.1 支架修复法
            1.2.3.2 细胞复合支架的修复方法
    1.3 展望
第二章 羊膜脱细胞基质支架的制备
    2.1 试验材料
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 试剂的配置
        2.1.3 主要仪器设备和耗材
    2.2 试验方法
        2.2.1 羊膜脱细胞基质支架的制备
        2.2.2 羊膜脱细胞情况的检测
        2.2.3 羊膜脱细胞基质与细胞相容性的检测
    2.3 试验结果
        2.3.1 人羊膜脱细胞前后的大体观察
        2.3.2 羊膜脱细胞基质的HE染色及扫描电镜观察
        2.3.3 羊膜脱细胞基质上种植细胞前后HE染色及扫描电镜观察
    2.4 讨论
第三章 负载骨髓MSCs和/或EPCs的羊膜支架修复犬长段尿道缺损的研究
    3.1 试验材料
        3.1.1 试剂与药品
        3.1.2 试验耗材
        3.1.3 试验仪器设备
        3.1.4 试验动物
    3.2 试验方法
        3.2.1 工程化尿道的构建
        3.2.2 尿道缺损模型的建立
        3.2.3 尿道缺损的修复
        3.2.4 逆行尿道造影
        3.2.5 剖检观察
        3.2.6 组织学观察
            3.2.6.1 HE染色观察
            3.2.6.2 Van Gieson染色观察
        3.2.7 统计学处理
    3.3 试验结果
        3.3.1 构建工程化尿道的结果
        3.3.2 建立犬尿道缺损模型并手术修复
        3.3.3 修复效果的检测结果
            3.3.3.1 术后排尿观察结果
            3.3.3.2 尿道逆行造影结果
            3.3.3.3 剖检结果
            3.3.3.4 组织学观察结果
    3.4 讨论
        3.4.1 排尿和尿道腔的变化
        3.4.2 尿道上皮的再生与覆盖
        3.4.3 尿道海绵体的再生
结论
参考文献
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]兔骨髓间充质干细胞向尿路上皮分化后构建膀胱组织工程化移植物[J]. 熊云鹤,杨嗣星,孟令超,廖文彪,宋超.  中国组织工程研究. 2014(32)
[2]再生医学在尿道修复重建中的应用[J]. 赵仁淹,傅强.  中华临床医师杂志(电子版). 2013(02)
[3]组织工程与干细胞技术在尿道重建中的应用[J]. 王营,傅强.  中华男科学杂志. 2012(03)
[4]多孔丝素复合脂肪间充质干细胞支架修复兔尿道缺损能促进血管的形成[J]. 张亚,周云,贾立山,翟景梅,苗小芬,王睿.  中国组织工程研究与临床康复. 2011(47)
[5]丝素蛋白膜对犬不同长度尿道缺损的修复效果[J]. 刘春晓,陈伟豪,郑少波,李虎林.  中国组织工程研究与临床康复. 2008(19)
[6]小肠黏膜下层修复尿道的实验研究[J]. 黄翔,罗静聪,廖勇,屈艺,杨志明.  中国修复重建外科杂志. 2006(03)

硕士论文
[1]骨髓间充质干细胞与人脱细胞羊膜构建组织工程骨膜的体外成骨研究[D]. 许伟阳.福建医科大学 2013



本文编号：3508211