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膀胱癌BIU-87细胞耐药株与敏感株间的P-糖蛋白转移

发布时间:2021-12-12 12:42
  目的P-糖蛋白是一类能量依赖性的转运蛋白,能将许多结构不同的抗肿瘤药物逆向转运出细胞,是导致肿瘤化疗失败的主要原因。本研究主要探讨膀胱癌细胞BIU-87耐药株与敏感株间是否存在功能性P一糖蛋白(P-gp)的转移及P-gp与多药耐药基因(mdrl)的关系。方法流式细胞检测分别检测BIU-87和BIU-87/ADM细胞的P-gp表达水平,将Hoechst33342染色BIU-87敏感株(BIU-87/Hoechst33342),并与BIU-87耐药株(BIU-87/ADM)通过Transwell系统共培养,激光共聚焦显微镜观察细胞间P-gp的转移。收集共培养体系下室的BIU-87/Hoechst33342细胞(BIU-87/aqMDR),采用western blot分析BIU-87/ADM、BIU-87/aqMDR、BIU-87/Hoechst33342、BIU-87细胞P-gp表达水平,同时应用RT-PCR分析这些细胞mdr1mRNA的表达水平。采用流式细胞术测BIU-87/ADM、BIU-87/aqMDR、BIU-87细胞罗丹明123外排功能。结果荧光显微镜下大量呈蓝色荧光细胞。激光共... 

【文章来源】:福建医科大学福建省

【文章页数】:40 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
中文摘要
ABSTRACT
英汉缩略词对照表
第一章 引言
第二章 材料与试剂
    1 实验材料
        1.1 实验对象
        1.2 主要试剂、耗材
        1.3 主要实验设备
        1.4 试验中试剂的配制
第三章 实验方法
    1. 细胞培养
    2. 流式细胞检测 P-gp 表达
    3. BIU-87 细胞 Hoechst33342 染色
    4. 建立人膀胱癌细胞敏感株 BIU-87、耐药株 BIU-87/ADM 共培养体系
    5. 激光扫描共聚焦显微镜观察细胞间P-gp的转移
    6. western blot分析P-gp蛋白表达水平
    7. RT-PCR检测mdr1基因mRNA表达
    8. 罗丹明 123 外排实验检测 P-gp 的转运功能
    9. 数据分析和统计处理
第四章 实验结果
讨论
结论
前瞻
参考文献
综述
    参考文献
致谢
硕士在读期间发表的文章


【参考文献】:
期刊论文
[1]骨髓间充质干细胞与关节软骨细胞Transwell共培养诱导形成软骨[J]. 王万宗,陈宗雄,刘晓强.  中国组织工程研究与临床康复. 2010(38)
[2]肝癌细胞HepG2间的P-糖蛋白传递作用[J]. 陈龙,左国庆,吴进峰,曾贵利,李涛,刘作金,唐开福.  中华肝脏病杂志. 2009 (11)
[3]人膀胱癌阿霉素耐药株BIU-87/ADM的建立及其耐药机理的研究[J]. 郭和清,鲁功成,熊旭林,董继华,刘绍春,赵时宇.  中华泌尿外科杂志. 1996(12)



本文编号:3536697

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