肠道菌群失衡诱发雄性小鼠生精障碍的研究
发布时间：2021-12-19 00:53
研究背景:随着生活质量的提高,人类西方化的饮食结构中脂肪类摄入比例已高达40%,大量临床研究发现,高脂饮食在引发肥胖和脂代谢紊乱的同时,对男性精子质量也会造成影响,主要表现为精子数量及活力下降、染色体受损以及精子形态异常。有研究表明高脂饮食会改变人体内肠道微生物的组成,进而打破肠道微生物的生态平衡。肠道微生物在宿主的营养吸收、肠道与免疫系统的功能、脂肪代谢、能量供应等诸多重要生理过程中发挥作用。肠道菌群组成的变化与肥胖、代谢综合征、癌症、神经系统退行性疾病的等的发生、发展和治疗密切相关。然而,肠道菌群组成的变化是否会影响精子质量尚不明确。因此,我们应用C57BL/6雄鼠模型以及临床不育男性的样品进行了以下研究:研究目的:研究高脂饮食诱导的肠道菌群失衡对雄性小鼠精子质量影响及相关机制。研究方法:1.动物研究:（1）肠道菌群失衡供体雄鼠模型的构建:在实验的全过程中,分别给予供体雄鼠正常饮食（Normal Diet,ND）和高脂饮食（High-fat Diet,HFD）,构建ND、HFD肠道菌群供体模型;（2）肠道菌群受体雄鼠模型的构建:通过肠道菌群替代实验（Fecal microbiota...
【文章来源】：广东工业大学广东省
【文章页数】：130 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１技术路线图??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ?Ｒｏａｄｍａｐ??
广东工业大学博士学位论文??②ＭｇＳ〇４母液：取４０ｍＬ超纯水加入０．３２ｇ的ＭｇＳＣＵ，涡旋至完全溶解即可；??③Ｋ２ＨＰＯ４母液：取４０?ｍＬ超纯水加入１．６?ｇ的Ｋ２ＨＰ０４，涡旋至完全溶解即可；??④ＫＨ２Ｐ〇４母液：取４０ｍＬ超纯水加入１．６ｇ的ＫＨ２Ｐ０４，涡旋至完全溶解即可；??⑤０．１％刃天青：取４０?ｍＬ超纯水加入０．０４?ｇ刃天青，涡旋至完全溶解即可。??（３）调节ｐＨ：用ｌＭＮａＯＨ于室温下调节培养液ｐＨ至７．３±０．２；??（４）抽真空：用抽真空装置（图５－２．１６）抽真空到－０．０６?Ｐａ，保持３０?ｓ?（２００?ｍＬ??血清瓶保持３０?ｓ，?１５?ｍＬ西林瓶保持１５?ｓ），充氮气至０．０７?Ｐａ，保持３０?ｓ／１５ｓ，抽空气??吹氮气重复３次；??ｍ??图５－２．１６抽真空装置??Ｆｉｇｕｒｅ?５－２．１６?Ｅｖａｃｕａｔｉｎｇ?ｄｅｖｉｃｅ??（５）灭菌：高压蒸汽灭菌锅１２１°Ｃ灭菌２０分钟；??（６）液体接种：（在生物安全柜中操作）取４°Ｃ存放的配置好的培养基，按比例加??入氯化血红素后，吸取母液１?ｍＬ至添加好氯化血红素的培养液中；??（７）接种后的西林瓶放置在３７°Ｃ，２２０?ｒｐｍ的恒温摇床中培养。??（８）菌种的保种与冻存：取对数增长期菌液７?ｍＬ，加入到含有７?ｍＬ?５０％甘油水??溶液的２０?ｍＬ抽真空灭菌的西林瓶中，放置于超低温冰箱长期保存。其中甘油是在冻??存时减少冰晶的形成，冰晶会刺破细胞壁。同样西林瓶中加好甘油水溶液抽真空后灭??菌使用。??２．２．４．１７肠粘膜通透性检测??（１）血清样本收集：用纯水将ｎＴＣ－ｌａｂｌｅｄｄｅｘｔｒａｎ４０００稀释成５０ｍｇ／ｍ
【参考文献】：
期刊论文
[1]Tight junctions in inflammatory bowel diseases and inflammatory bowel disease associated colorectal cancer[J]. Jonathan Landy,Emma Ronde,Nick English,Sue K Clark,Ailsa L Hart,Stella C Knight,Paul J Ciclitira,Hafid Omar Al-Hassi. World Journal of Gastroenterology. 2016(11)
本文编号：3543473
【文章来源】：广东工业大学广东省
【文章页数】：130 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１技术路线图??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ?Ｒｏａｄｍａｐ??
广东工业大学博士学位论文??②ＭｇＳ〇４母液：取４０ｍＬ超纯水加入０．３２ｇ的ＭｇＳＣＵ，涡旋至完全溶解即可；??③Ｋ２ＨＰＯ４母液：取４０?ｍＬ超纯水加入１．６?ｇ的Ｋ２ＨＰ０４，涡旋至完全溶解即可；??④ＫＨ２Ｐ〇４母液：取４０ｍＬ超纯水加入１．６ｇ的ＫＨ２Ｐ０４，涡旋至完全溶解即可；??⑤０．１％刃天青：取４０?ｍＬ超纯水加入０．０４?ｇ刃天青，涡旋至完全溶解即可。??（３）调节ｐＨ：用ｌＭＮａＯＨ于室温下调节培养液ｐＨ至７．３±０．２；??（４）抽真空：用抽真空装置（图５－２．１６）抽真空到－０．０６?Ｐａ，保持３０?ｓ?（２００?ｍＬ??血清瓶保持３０?ｓ，?１５?ｍＬ西林瓶保持１５?ｓ），充氮气至０．０７?Ｐａ，保持３０?ｓ／１５ｓ，抽空气??吹氮气重复３次；??ｍ??图５－２．１６抽真空装置??Ｆｉｇｕｒｅ?５－２．１６?Ｅｖａｃｕａｔｉｎｇ?ｄｅｖｉｃｅ??（５）灭菌：高压蒸汽灭菌锅１２１°Ｃ灭菌２０分钟；??（６）液体接种：（在生物安全柜中操作）取４°Ｃ存放的配置好的培养基，按比例加??入氯化血红素后，吸取母液１?ｍＬ至添加好氯化血红素的培养液中；??（７）接种后的西林瓶放置在３７°Ｃ，２２０?ｒｐｍ的恒温摇床中培养。??（８）菌种的保种与冻存：取对数增长期菌液７?ｍＬ，加入到含有７?ｍＬ?５０％甘油水??溶液的２０?ｍＬ抽真空灭菌的西林瓶中，放置于超低温冰箱长期保存。其中甘油是在冻??存时减少冰晶的形成，冰晶会刺破细胞壁。同样西林瓶中加好甘油水溶液抽真空后灭??菌使用。??２．２．４．１７肠粘膜通透性检测??（１）血清样本收集：用纯水将ｎＴＣ－ｌａｂｌｅｄｄｅｘｔｒａｎ４０００稀释成５０ｍｇ／ｍ
【参考文献】：
期刊论文
[1]Tight junctions in inflammatory bowel diseases and inflammatory bowel disease associated colorectal cancer[J]. Jonathan Landy,Emma Ronde,Nick English,Sue K Clark,Ailsa L Hart,Stella C Knight,Paul J Ciclitira,Hafid Omar Al-Hassi. World Journal of Gastroenterology. 2016(11)
本文编号：3543473
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