Hsf1-一种新的睾丸支持细胞雄激素受体靶基因

发布时间：2021-12-22 22:25

　　目的：探讨雄激素受体（AR）对睾丸支持细胞中热休克转录因子1（Hsf1）基因表达的影响及其作用的分子机制。方法：采用PCR、Western blot的方法，比较AR特异性敲除（S-AR-/y）小鼠和野生型（WT）小鼠睾丸组织中的Hsf1表达差异以及雄激素及雄激素受体结合对TM4细胞系中Hsf1和HSPs表达水平的影响；采用双荧光素酶报告基因检测系统（Luciferase report）、凝胶电泳迁移实验（Electrophoretic mobility shiftassay， EMSA）和染色质免疫共沉淀实验（Chromatin immunoprecipitationassay，ChIP），探讨AR调控Hsf1基因表达的分子机制。结果：RT-PCR实验结果及Western Blot实验结果显示：与WT小鼠比较，S-AR-/y小鼠睾丸组织中Hsf1表达水平显著升高；雄激素显著降低经过AR转染的TM4细胞中Hsf1mRNA和HSF1蛋白表达水平。并且Western Blot实验发现：HSF1能够升高热休克蛋白105（HSP105）和HSP60水平，但对HSP27、HSP40、HSP70和H... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
第一章 引言
第二章 材料与方法
    2.1 实验动物及细胞培养
    2.2 实验试剂及仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 总 RNA 提取及荧光定量 PCR
        2.3.2 Western blot 实验
        2.3.3 质粒构建及细胞转染
        2.3.4 Luciferase 实验
        2.3.5 凝胶电泳迁移实验(EMSA)
        2.3.6 染色体免疫共沉淀实验(CHIP)
    2.4 统计学方法
第三章 实验结果
    3.1 Hsf1 基因在 S-AR-/y小鼠睾丸中的表达
    3.2 Hsf1 基因在 TM4 细胞中的表达
    3.3 HSF1 蛋白在 TM4 细胞中的表达差异
    3.4 AR 基因是否与 Hsf1 基因的启动子直接结合
    3.5 AR 基因通过结合 Hsf1 上游启动子抑制其表达
    3.6 探讨热休克蛋白在 TM4 细胞中的表达水平
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
攻读硕士期间发表文章情况
个人简历
附录
    附表 1：缩略语表
    附表 2：主要试剂
致谢
综述
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]精子发生过程中基因表达转录水平的调控[J]. 张秀军,刘美玲,贾孟春.  遗传. 2011(12)
[2]睾丸支持细胞的生物学特性及研究进展[J]. 余晓晖,胡云飞.  中国组织工程研究与临床康复. 2010(44)
[3]雄激素受体的结构和功能[J]. 黄宝锋,刘智皓,吴风瑞,王德寿.  四川动物. 2008(02)
[4]雄激素对精子发生的影响[J]. 郑新民,郑航,张林.  医学新知杂志. 2008(01)
[5]精子功能检测与男性不育诊治的新进展[J]. 刘德一,H.W.Gordon Baker.  中华男科学杂志. 2007(02)
[6]雄激素缺乏与勃起功能障碍[J]. 潘连军,夏欣一,黄宇烽.  中华男科学杂志. 2006(11)
[7]烷化剂类药物对睾丸生殖功能影响[J]. 何大维,李旭良.  国外医学（计划生育/生殖健康分册）. 2006(01)
[8]从基因敲除看生殖激素的作用[J]. 魏鹏,丁乃峥,杨增明.  生殖医学杂志. 2002(05)
[9]雄激素受体的作用机制[J]. 解芳,刘峻,张永莲.  生物化学与生物物理进展. 1999(02)
[10]雄激素在皮肤的代谢及抗雄激素的应用[J]. 傅爰锟,李娥香.  江西医药. 1982(04)



本文编号：3547213