1,25-二羟维生素D3对IgA肾病大鼠中IL-4的调节作用
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【摘要】:目的:本研究主要通过观察1,25(OH)_2D_3对IgA肾病大鼠IL-4的影响,探讨1,25(OH)_2D_3对大鼠IgAN的免疫调节作用,为临床治疗IgA肾病提供新的思路。方法:(1)选用Wister大鼠52只,随机抽取8只大鼠作为正常对照组(A组),余44只大鼠采用抗原(牛γ球蛋白)直接刺激粘膜免疫的方式建立IgA肾病模型。(2)剔除造模鉴定用大鼠及死亡大鼠,将造模成功的32只大鼠随机分为为干预组(B组)、强的松组(C组)、1,25(OH)_2D_3组(D组)、及强的松+1,25(OH)_2D_3联合治疗组(E组),每组8只,各治疗组分别进行相应的药物干预,正常对照组及未干预组给予等量生理盐水灌胃。(3)分别检测各组大鼠尿红细胞计数、24小时尿蛋白、血肌酐、血钙、血磷的变化情况,采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测各大鼠脾脏淋巴细胞白细胞介素4(IL-4)mRNA的水平,采用免疫组化及Western blot检测大鼠肾脏IL-4蛋白水平的变化。结果:(1)_24小时尿蛋白定量(mg/24h):A组(正常对照组)为7.27±0.86;B组(未干预组)为49.37±2.96;C组(强的松组)为15.26±1.57;D组(1,25(0H)_2D_3治疗组)为21.05±2.06;E组(强的松+1,25(0H)_2D_3联合治疗组)为10.16±1.39。经治疗后C、D、E组24h尿蛋白较B组均有下降(P0.05),其中E组下降最显著(P0.05)。(2)尿红细胞计数(个/ul):A组为5.03±2.55;B组为328±7.04;C组为18±3.06;D组为162±5.36;E组为9±3.15。经治疗后C、D、E组尿红细胞计数较B组均有下降(P0.05),其中E组下降最显著(P0.05)。(3)各组大鼠的血肌酐(μmol/L)水平:A组为42.76±2.42;B组为45.23±2.01;C组为45.21±1.52;D组为43.98±2.36;E组为43.44±2.4。各组大鼠的血钙(mmol/L)水平:A组为2.35±0.22、B组2.28±0.17、C组2.38±0.09、D组2.44±0.11、E组2.50±0.14。各组大鼠的血磷(mmol/L)水平:A组为2.85±0.27;B组为2.90±0.32;C组为2.86±0.22;D组为2.89±0.33;E组为2.80±0.25。各组血肌酐、血钙、血磷水平未见显著变化,差别无统计学意义(P0.05)。(4)IL-4平均光密度值:A组为0.080±0.030;B组为0.230±0.013:;C组为0.162±0.021;D组为0.199±0.031;E组为0.092±0.024。经治疗后C、D、E组平均光密度较B组均有下降(P0.05),其中E组下降最显著(P0.05);IL-4的表达与24小时尿蛋白呈正相关(P0.05),与尿红细胞计数无明显相关性。(5)大鼠脾脏淋巴细胞IL-4的mRNA相对表达量:A组为0.1897±0.0010;B组为0.8314±0.0013;C组为0.5901±0.0008;D组为0.6617±0.0018;E组0.3822±0.0007。经治疗后C、D、E组尿红细胞计数较B组均有下降(P0.05),其中E组下降最显著(P0.05)。(6)大鼠肾脏IL-4蛋白表达:A组、B组、C组、D组、E组分别为0.137±0.004、0.701±0.003、0.390±0.001、0.517±0.004、0.289±0.002。经治疗后C、D、E组平均光密度较B组均有下降(P0.05),其中E组下降最显著(P0.05)。结论:(1)1,25(OH)_2D_3可能降低IgA肾病大鼠尿蛋白尿的水平,起到肾脏保护作用。(2)1,25(OH)_2D_3可能通过调节IgA肾病大鼠IL-4的表达而发挥免疫调节作用。
【关键词】:1 25-二羟维生素D3 IgA肾病 IL-4
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R692.31
【目录】:
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-10
- 常见英文缩略表10-11
- 前言11-13
- 第一章 IgA肾病(IgAN)大鼠模型的建立13-15
- 1.1 实验材料13-14
- 1.2 实验方法14-15
- 第二章 1,25(OH)_2D_3对IgAN大鼠血尿,蛋白尿,血肌酐,血钙,血磷及IL-4 的影响15-23
- 2.1 实验材料15-17
- 2.2 实验方法17-22
- 2.3 统计学方法22-23
- 第三章 统计结果23-32
- 3.1 大鼠的一般情况23
- 3.2 大鼠24小时尿蛋白定量及尿红细胞计数结果23-25
- 3.3 大鼠血肌酐,血钙,血磷浓度测定结果25-26
- 3.4 大鼠肾组织病理学结果26-29
- 3.5 大鼠脾脏中IL-4 mRNA测定结果29-30
- 3.6 大鼠肾脏中IL-4 的蛋白测定结果30-32
- 讨论32-36
- 结论36-37
- 参考文献37-43
- 综述43-52
- 参考文献48-52
- 致谢52-53
- 在学期间发表的学术论文与研究成果53-54
- 个人简历54
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