前列腺癌PC-3细胞抗TRAIL诱导凋亡的分子机制研究

发布时间：2022-01-26 13:23

　　背景与目的：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）能够诱导PC-3细胞凋亡而不损伤正常细胞。部分PC-3细胞能够对TRAIL产生抵抗作用，但目前对其发生发展的分子机制尚不完全清楚，相关机制有待进一步探讨阐述。方法：将体外培养的PC-3细胞分为对照组（仅加培养基）和实验组（不同浓度滴度的TRAIL处理），作用时间24⁷2h。MTT法检测细胞抑制率，筛选出抵抗TRAIL治疗的PC-3细胞，Q-PCR检测FLIP、DR4、DR5、FADD和caspase-8基因表达情况。结果：1. TRAIL对PC-3细胞具有一定增殖抑制作用，细胞平均存活率随着TRAIL作用时间延长而减少；同时与TRAIL浓度有关，在200ng/ml的TRAIL时，对PC-3细胞的增殖抑制作用较强。2. Q-PCR检测结果显示TRAIL作用24h的PC-3细胞较对照组的FLIP、DR4、DR5、FADD和caspase-8基因的表达降低；随着TRAIL作用时间延长至72h，DR4、DR5、FADD和caspase-8基因的表达下降，而FLIP表达上升。结论：1、体外实验TRAIL对于PC-3治疗具... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：44 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
目录
第1章 前言
第2章 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 细胞来源
        2.1.2 主要仪器
        2.1.3 主要试剂及耗材
        2.1.4 实验试剂配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 细胞传代
        2.2.3 细胞计数
        2.2.4 细胞冻存
        2.2.5 细胞复苏
        2.2.6 TRAIL 处理
        2.2.7 实验分组
        2.2.8 MTT 法测定细胞增殖活性
        2.2.9 引物序列设计
        2.2.10 RNA 抽提
        2.2.11 反转录
        2.2.12 荧光定量 PCR 检测
    2.3 统计学处理
第3章 结果
    3.1 TRAIL 对 PC-3 细胞 MTT 实验
    3.2 Q-PCR 检测内参及目的基因的 mRNA 表达水平的变化
        3.2.1 Q-PCR 测定内参及目的基因的相对定量结果
        3.2.2 Q-PCR 测定内参及目的基因成员的 mRNA 表达水平
第4章 讨论
    4.1 TRAIL 可能成为 AIPC 治疗药物
    4.2 PC3-TR 细胞的建立方法
    4.3 FLIP 表达升高是 PC3-TR 细胞形成主要机制
    4.4 抵抗 TRAIL 治疗的 AIPC 机制有待进一步阐述
第5章 结论
致谢
参考文献
附图
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]TRAIL对多种肿瘤细胞的杀伤作用[J]. 杨雷,杨联萍,李茹冰,孔祥平,庞建新.  中国病理生理杂志. 2007(06)
[2]TRAIL抑制人前列腺癌细胞PC-3M体外生长的实验研究[J]. 陈江,陈晓春,曾甫清.  肿瘤防治研究. 2004(07)



本文编号：3610566