前列地尔对糖尿病肾病患者尿外泌体中IL-6表达水平的影响

发布时间：2022-02-19 16:23

　　目的:本研究观察糖尿病肾病（Diabetic nephropathy,DN）患者尿外泌体中白细胞介素-6（Interleukin 6,IL-6）的表达情况,前列地尔治疗对DN患者尿蛋白水平、肾功能及尿外泌体中IL-6表达水平的影响,为进一步探索前列地尔（Prostaglandin E1,PGE1）治疗DN提供理论依据及新的分子生物学机制理论。方法:收集吉大二院2019年7月至2019年12月符合实验入选标准的糖尿病肾病患者的临床及化验指标,其中使用基础用药前提下联合前列地尔注射液（10ug/d,1周）的患者作为实验组,基础用药患者作为对照组,并且用药1周前后收集其晨起新鲜尿液200ml,通过差速超速离心法,提取外泌体,通过投射电子显微镜鉴定外泌体的形态及免疫蛋白印记（Western blot,WB）法鉴定外泌体的特异性标记蛋白,BCA法测其浓度,通过Western blot法检测外泌体中IL-6的表达水平变化。通过试剂盒法提取尿外泌体上的mRNA,通过实时荧光定量反转录PCR法检测外泌体中IL-6的mRNA表达量变化。明确前列地尔治疗对DN患者临床化验指标及尿外泌体中IL-6表达水平的... 

【文章来源】：吉林大学吉林省211工程院校985工程院校教育部直属院校

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
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中英文缩略词表
第1章 引言
第2章 综述
    2.1 DN概述
    2.2 IL-6与DN关系
    2.3 DN的治疗
        2.3.1 DN治疗概述
        2.3.2 PGE1 治疗DN
    2.4 尿外泌体与DN综述
        2.4.1 外泌体研究概述
        2.4.2 外泌体的分离与鉴定
        2.4.3 外泌体在DN诊断及治疗中的研究进展
    2.5 外泌体作为药物载体参与疾病的治疗过程
第3章 材料与方法
    3.1 主要试剂
    3.2 主要器材
    3.3 研究对象
    3.4 尿外泌体的提取与分离
    3.5 透射电镜下鉴定外泌体的大小及形态
    3.6 Western Blot法鉴定尿外泌体上特异性标记蛋白及实验的目的蛋白
        3.6.1 BCA法测定提取的外泌体标本的蛋白浓度
        3.6.2 蛋白变性
        3.6.3 SDS-PAGE凝胶电泳
    3.7 试剂盒法提取尿外泌体mRNA
    3.8 使用Nano Drop2000 检测提取的mRNA浓度
    3.9 逆转录合成cDNA
    3.10 Real-time PCR检测IL-6的m RNA表达量
    3.11 Western Blot检测目的蛋白IL-6 的表达
    3.12 数据统计、分析
第4章 结果
    4.1 患者基本信息分析
    4.2 用药前两组患者实验室检查比较
    4.3 两组患者用药前后实验室检查比较
    4.4 DN患者尿外泌体的电镜鉴定分析
    4.5 DN患者尿外泌体标记蛋白的western blot法鉴定
    4.6 PGE1 治疗对DN患者尿外泌体中IL-6 表达水平的影响
        4.6.1 RT-qPCR结果分析
        4.6.2 Western Blot结果分析
第5章 讨论
第6章 结论
参考文献
作者简介及在学期间科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[2]外泌体分离技术及其临床应用研究进展[J]. 高方园,焦丰龙,张养军,秦伟捷,钱小红.  色谱. 2019(10)
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[4]血清同型半胱氨酸水平与2型糖尿病肾病的相关性研究[J]. 李圣琦,杨峥,吴林秀.  中国校医. 2019(09)
[5]外泌体在膀胱癌中的研究前景周万明综述,鲁雄兵校审[J]. 周万明,鲁雄兵.  现代泌尿外科杂志. 2019(09)
[6]糖尿病肾病早期诊断标志物的研究进展[J]. 李国蓉,江彤.  世界最新医学信息文摘. 2019(71)
[7]AGEs-RAGE信号通路在糖尿病肾病中的作用机制及中医药研究进展[J]. 杨超茅,杨志新,马晓玲.  中医学报. 2019(09)
[8]外泌体在糖尿病及其并发症的发生、发展和诊治中的作用[J]. 寿崟,马宇航,虎力,徐平,张伟波,高原,张必萌.  生理学报. 2019(06)
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博士论文
[1]高糖刺激巨噬细胞来源外泌体诱导肾脏损伤的作用与机制[D]. 朱梅.安徽医科大学 2019
[2]12（S）-HETE对糖尿病肾病肾小球内白介素-6表达的影响及其机制研究[D]. 孙韬.吉林大学 2017

硕士论文
[1]前列地尔治疗对糖尿病肾病患者尿外泌体中PAI-1表达水平的影响[D]. 石冰青.吉林大学 2019
[2]雷公藤甲素通过上调miR-224-3p改善高糖诱导的NRK-52E细胞炎症反应[D]. 胡绍兰.天津医科大学 2017
[3]人尿源干细胞来源的外泌体对1型糖尿病大鼠的肾脏保护作用及其机制研究[D]. 姜珍珍.苏州大学 2015
[4]白细胞介素-18、白细胞介素-6的基因多态性与2型糖尿病肾病的相关性分析[D]. 康乐.河北医科大学 2015
[5]PGE1改善高糖联合TNF-α损伤大鼠肾小球系膜细胞及机制研究[D]. 袁园.南方医科大学 2013



本文编号：3633226