自噬在高糖诱导的巨噬细胞经典活化中的作用

发布时间：2022-08-02 11:58

　　目的:巨噬细胞浸润是糖尿病肾病（Diabetic Nephropathy,DN）的重要组织病理特征,其在局部微环境中的活化状态是决定疾病转归和预后的主要因素。前期研究结果表明DN患者肾组织中浸润的巨噬细胞以M1型活化为主,M2型所占比例明显下降。自噬是一种由溶酶体介导的对细胞内过多或异常的蛋白质及细胞器进行降解的过程,是一个高度动态的、多阶段的过程,也称为自噬流,主要包括自噬体和自噬溶酶体两个阶段。近来研究发现,自噬在许多细胞功能的调节中发挥着重要作用,然而其在巨噬细胞M1/M2表型转换中是否存在作用及具体机制尚需进一步探讨。本研究拟通过体外培养巨噬细胞,探讨自噬对高糖环境下巨噬细胞活化状态的影响,并进一步探索自噬流各阶段对巨噬细胞表型转化的影响,为利用自噬调控巨噬细胞活化状态来防治疾病的发生和发展提供可能。方法:（1）用30.0 mmol/L葡萄糖孵育小鼠巨噬细胞RAW264.7,用自噬激活剂（RAPA）及抑制剂（3-MA）干预,通过Western blot、免疫荧光检测M1型标志物iNOS、TNF-α和M2型标志物MR、Arg-1,及自噬标志物LC3、Beclin-1、p62的表达... 

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩写词表
第一章 绪论
    1.1 糖尿病肾病与巨噬细胞
    1.2 自噬失调参与糖尿病肾病发展
    1.3 自噬与巨噬细胞表型
    1.4 自噬流的概念
    1.5 展望
第二章 文献综述
    2.1 巨噬细胞概述
    2.2 巨噬细胞表型与功能
    2.3 巨噬细胞与肾脏损伤和修复
    2.4 总结
第三章 研究材料
    3.1 细胞株选择
    3.2 主要仪器
    3.3 主要试剂及配制
第四章 实验方法
    4.1 细胞培养
    4.2 Westernblot
    4.3 免疫荧光技术
    4.4 超薄切片技术
    4.5 数据处理和统计学统计
第五章 研究内容
    5.1 自噬对高糖诱导的巨噬细胞(RAW264.7)活化状态的影响
    5.2 巨噬细胞(RAW264.7)经典活化模型(M1模型)的自噬情况
    5.3 自噬流各阶段对巨噬细胞(RAW264.7)经典活化模型(M1模型)表型转化的影响
第六章 技术路线
    6.1 自噬对高糖诱导的巨噬细胞(RAW264.7)活化状态的影响
    6.2 自噬流各阶段对巨噬细胞(RAW264.7)M1/M2型表型转化的影响
第七章 研究结果
    7.1 自噬参与高糖诱导的小鼠巨噬细胞(RAW264.7)M1型活化
    7.2 调节自噬流可调控小鼠巨噬细胞(RAW264.7)M1/M2表型转化
第八章 讨论
第九章 结论
致谢
参考文献
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]Diabetic nephropathy and inflammation[J]. Montserrat B Duran-Salgado,Alberto F Rubio-Guerra.  World Journal of Diabetes. 2014(03)



本文编号：3668480