骨髓间充质干细胞源外泌体miR-21-5p通过下调PHLPP2促进前列腺癌PC-3细胞的增殖、迁移和侵袭

发布时间：2022-10-06 19:44

　　目的:探讨骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC）来源的外泌体对前列腺癌细胞PC-3的增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:采用q PCR检测miR-21-5p在前列腺癌细胞系中的表达水平。采用电子显微镜观察BMSC分离出的外泌体形态,Western blotting检测外泌体表面标志物的表达以及上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关蛋白E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达。采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-21-5p和同源血小板富亮氨酸复重蛋白磷酸酶2（PH domain leucine-rich repeat protein phosphatase 2,PHLPP2）的靶向调控关系。向PC-3细胞培养液中加入10μl的BMSC外泌体悬液（Exo组）、转染sh-PHLPP2或antagomiR,CCK-8和Transwell实验检测PC-3细胞增殖和迁移能力。结果:miR-21-5p在前列腺癌PC-3细胞系中高表达。成功分离BMSC培养... 

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1材料与方法
    1.1主要材料与试剂
    1.2分离和提取小鼠BMSC
    1.3 BMSC外泌体的分离
    1.4细胞分组和转染
    1.5 qPCR检测miR-21-5p的表达
    1.6双荧光素酶报告基因验证miR-21-5p与PHLPP2的靶向作用
    1.7 WB实验检测miR-21-5p和PHLPP2对PC-3细胞中相关蛋白表达的影响
    1.8 CCK-8实验检测PC-3细胞增殖活力
    1.9 Transwell实验检测PC-3细胞的侵袭、迁移能力
    1.10统计学处理
2结果
    2.1成功分离BMSC外泌体
    2.2 BMSC外泌体促进PC-3细胞增殖、迁移、侵袭和EMT相关蛋白的表达
    2.3与BMSC外泌体共培养的PC-3细胞中miR-21-5p表达上调
    2.5 BMSC外泌体miR-21-5p通过下调PHLPP2促进PC-3细胞增殖、迁移和侵袭
    2.4 miR-21-5p对PHLPP2的调控作用
3讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Identification and prediction of novel non-coding and coding RNA-associated competing endogenous RNA networks in colorectal cancer[J]. Yu Liang,Cheng Zhang,Ming-hui Ma,Dong-qiu Dai.  World Journal of Gastroenterology. 2018(46)



本文编号：3687289