TRAP1通过TGF/Smad3通路对膀胱癌的迁移和侵袭能力的影响

发布时间：2022-10-30 13:27

　　目的:探讨TRAP1蛋白对膀胱癌细胞迁移和侵袭的影响及机制。方法:采用Western blot从膀胱癌细胞株中挑选出高表达TRAP1的细胞系BIU-87;使用TRAP1沉默慢病毒（LV3-TRAP1）沉默TRAP1,使用GFP荧光及PCR检测LV3-TRAP1沉默效率;Transwell和划痕实验分别检测沉默TRAP1蛋白表达后对膀胱癌细胞侵袭和迁移能力的影响;CMH2DCFDA荧光染色细胞检测膀胱癌细胞内活性氧水平;Western blot检测相关信号通路TGF/Smad3蛋白的表达情况。结果:LV3-TRAP1慢病毒可以有效地抑制TRAP1蛋白的表达;沉默TRAP1蛋白的表达可以有效抑制膀胱癌细胞的侵袭和迁移能力、降低膀胱癌细胞内活性氧水平;同时TGF/Smad3信号通路中的TGF、Smad2及Smad3蛋白表达也相应降低。结论:沉默TRAP1蛋白可以通过调控TGF/Smad3信号通路来抑制膀胱癌细胞的侵袭和迁移能力。 

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞株与主要试剂
    1.2 方法
        1.2.1 慢病毒转染BIU-87细胞
        1.2.2 实验分组
        1.2.3 PCR检测转染慢病毒TRAP1的沉默效率
        1.2.4 Western blot检测TRAP1、TGF-β和Smad3蛋白的表达
        1.2.5 Transwell侵袭实验检测TRAP1的表达对膀胱癌细胞侵袭能力的影响
        1.2.6 划痕实验检测TRAP1的表达对膀胱癌细胞迁移能力的影响
        1.2.7 细胞活性氧 (ROS) 检测
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 TRAP1在不同膀胱癌细胞株中的表达
    2.2 转染慢病毒TRAP1的沉默效率
    2.3 沉默TRAP1后膀胱癌细胞BIU-87的迁移能力变化
    2.4 沉默TRAP1后膀胱癌细胞BIU-87的侵袭能力变化
    2.5沉默TRAP1后细胞活性氧水平检测
    2.6 沉默TRAP1后TGF/Smad3信号通路的蛋白水平变化
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]TRAP1 Shows Clinical Significance and Promotes Cellular Migration and Invasion through STAT3/MMP2 Pathway in Human Esophageal Squamous Cell Cancer[J]. Yunwei Ou,Lingyan Liu,Liyan Xue,Wei Zhou,Zitong Zhao,Bainan Xu,Yongmei Song,Qimin Zhan.  Journal of Genetics and Genomics. 2014(10)



本文编号：3698971