雷帕霉素诱导肿瘤相关巨噬细胞自噬调节膀胱癌细胞上皮间质转化的机制研究

发布时间：2022-11-06 15:01

　　目的:探讨通过雷帕霉素诱导肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）自噬以及对TAMs自噬的调控来调节膀胱癌细胞上皮间质转化（EMT）的机制。方法:用免疫组化染色、免疫荧光检测膀胱癌组织和癌旁组织中的自噬相关蛋白LC3、EMT相关调节因子的表达水平,并用电镜观察其中自噬小体数量。人单核细胞（THP-1）细胞用PMA和IL-4+IL-10相继作用72h,诱导细胞极化为TAMs（M2）,观察细胞形态学变化,并用流式细胞术及免疫荧光检测M1和M2表面CD86,CD206,F4/80等标志性分子表达情况,鉴定TAMs极化效率。用自噬调节剂雷帕霉素、3-MA干预TAMs 24h,去除自噬调节药物的干预48h后,通过Western Blot以及免疫荧光检测LC3表达,以及电镜观察自噬小体数量,确定药物干预后的TAMs自噬水平。将雷帕霉素干预后的TAMs与人膀胱癌细胞（T24）进行非接触共培养,Western Blot检测膀胱癌细胞EMT相关因子的表达,并通过transwell、划痕方法检测膀胱癌细胞的侵袭和迁移能力。结果:免疫组化染色检测显示,膀胱癌组织中的自噬相关蛋白LC3和EMT相关调节因子的表达水平以及自... 

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
引言
材料与方法
结果
讨论
结论
参考文献
致谢
附录A 中英文对照缩略词表
附录B 主要试剂配制方法
附录C 个人简介
附录D 肿瘤微环境与膀胱癌相关性的研究进展
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]同步热放化疗治疗在中晚期宫颈癌的应用价值[J]. 俞青青,唐荣军,楼军,俞玉凤,何玲红.  中国妇幼健康研究. 2015 (04)
[2]肺癌中血管内皮生长因子及突变型p53基因表达及其临床意义研究[J]. 李印,车国卫,周清华,许金良.  中国肺癌杂志. 2001(05)



本文编号：3703709