脂氧素A 4 通过激活PPARγ/Nrf2/HO-1途径保护HK-2细胞缺氧/复氧损伤

发布时间：2022-11-08 20:33

　　目的:探讨脂氧素A4（lipoxin A4,LXA4）在人肾脏近曲小管上皮细胞（HK-2）缺氧/复氧损伤中的保护作用及可能机制。方法:LXA4预处理HK-2细胞后进行缺氧/复氧处理,CCK-8法检测细胞活性水平,ELISA法检测细胞上清液γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）、氨基葡萄糖苷酶（NAG）和亮氨酸氨基肽酶（LAP）水平,羟胺法检测细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性,硫代巴比妥酸法检测细胞丙二醛（MDA）水平,实时定量PCR和Western blot法分别检测HK-2细胞的过氧化物酶体增殖子活化受体γ（PPARγ）和血红素加氧酶-1（HO-1）的m RNA和蛋白表达的变化,利用RNA干扰技术干扰PPARγ表达后检测HO-1和核因子E2相关因子2（Nrf2）的表达。结果:LXA4预处理的缺氧/复氧组细胞活性和SOD活性明显升高,细胞中γ-GT、NAG、LAP和MDA水平降低,而加入HO-1抑制剂锌原卟啉（Zn PP）和转染PPARγ的si RNA后,LXA4对HK-2细胞缺氧/复氧损伤的保护作用被阻断;此外,LXA4预处理的缺氧/复氧组HO-1、PPARγ和Nrf2表达均明显升高,并且LX... 

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1材料和方法
    1.1材料
    1.2方法
        1.2.1HK-2培养及分组
        1.2.2干扰细胞株的构建
        1.2.3CCK-8检测细胞活性
        1.2.4ELISA法测定HK-2细胞γ-GT、NAG和LAP水平
        1.2.5HK-2细胞SOD活力和MDA水平测定
        1.2.6Westernblot检测HK-2细胞HO-1、PPARγ和Nrf2蛋白表达水平
        1.2.7实时定量PCR检测HK-2细胞HO-1和PPARγmRNA表达
    1.3统计学方法
2结果
    2.1LXA4预处理对HK-2细胞缺氧/复氧损伤后细胞活性的影响
    2.2RNA干扰对HK-2细胞PPARγ蛋白表达的影响
    2.3LXA4预处理对PPARγmRNA和蛋白表达的影响
    2.4LXA4预处理对HO-1mRNA和蛋白表达的影响
    2.5LXA4预处理对Nrf2蛋白表达的影响
    2.6LXA4预处理通过HO-1和PPARγ对HK-2细胞γ-GT、NAG、LAP和MDA水平及SOD活性的影响
3讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]PPARγ激动剂对脑缺血再灌注损伤保护作用的研究进展[J]. 孙军,刘开祥.  中国实用神经疾病杂志. 2011(17)
[2]支气管哮喘豚鼠BALF炎症细胞中PPARγ、Nrf2和γ-GCS-h表达的变化[J]. 陈健,戴爱国,胡瑞成,朱黎明.  中国病理生理杂志. 2010(04)
[3]以PPAR为靶点防治肾脏疾病药物研究进展[J]. 张恒艾,杜冠华.  中国药学杂志. 2010(07)
[4]脂氧素A4对心肌缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 王国华,钟爱梅,孙宗全,夏家红,刘金平,柳祎,冯剑锷.  中华胸心血管外科杂志. 2009 (03)



本文编号：3704518