高糖和血管紧张素Ⅱ通过TLR4途径协同刺激大鼠肾小球系膜细胞炎症因子的表达及干预研究

发布时间：2022-11-09 21:09

　　目的：探讨高糖和血管紧张素Ⅱ是否可以协同刺激TLR4的表达及信号通路的激活，观察厄贝沙坦是否下调TLR4的表达，以及血管紧张素Ⅱ是否为TLR4的配体及AT1R与TLR4之间的可能协同关系。 方法：研究对象为大鼠肾小球系膜细胞（HBZY-1）。细胞同步化后分组：正常对照组（5.6mM D-glucose）、高糖组（25mM D-glucose）、血管紧张素Ⅱ（10-7.M）组、高糖+血管紧张素Ⅱ组、AngⅡ（10-7M）+厄贝沙坦（10-5M）组、AngⅡ+厄贝沙坦（10-5M）+TLR4阻断剂（10ug/ml）组。采用real-time PCR，westernblot检测TLR4,MyD88mRNA及蛋白的表达变化，分别收集细胞上清液用ELISA检测IL-6、MCP-1蛋白的表达。 结果：高糖和血管紧张素Ⅱ分别刺激肾小球系膜细胞12小时后TLR4、MyD88mRNA表达明显增加，刺激24小时细胞上清液IL-6、MCP-1的表达亦显著增加，与正常对照组相比差异显著（P＜0.01）。高糖和血管紧张素Ⅱ共同刺激HBZY-1细胞，下游因子MyD88mRNA及蛋白，炎症因子IL-6，... 

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
英汉缩略语名词对照
第1章 引言
第2章 高糖和血管紧张素Ⅱ通过TLR4协同刺激大鼠肾小球系膜细胞炎症因子的表达及干预研究
    2.1 材料
        2.1.1 细胞株
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器及耗材
    2.2 方法
        2.2.1 主要溶液的配置
        2.2.2 基本细胞实验
        2.2.3 实验分组
        2.2.4 荧光定量 PCR（real-time PCR）检测上述不同处理组 TLR4、MyD88 mRNA 的相对表达量的变化
        2.2.5 western blot 分析各处理组 TLR4、MyD88 蛋白的相对表达量
        2.2.6 ELISA 分析各处理组细胞上清液中 IL-6、MCP-1 的表达量的变化
        2.2.7 统计学处理
    2.3 结果
        2.3.1 RNA 溶度和纯度的检测
        2.3.2 real-time PCR 检测 TLR4、MyD88 mRNA 相对表达量结果
        2.3.3 western blot 检测 TLR4、MyD88 蛋白表达结果
        2.3.4 ELISA 检测各组细胞上清液 IL-6、MCP-1 的表达变化
    2.4 讨论
第3章 结论
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]脂多糖对2型糖尿病肾病患者单核细胞TLR4水平及NF-κB,Notch1表达的影响[J]. 杨孟雪,甘华,沈清.  中南大学学报(医学版). 2012(06)



本文编号：3704898