长链非编码RNA PVT1通过miR-186靶向调控Twist1促进前列腺癌上皮间质化的机制研究

发布时间：2022-12-11 07:17

　　目的:浆细胞瘤变异型易位体1（PVT1）是一种新的长链非编码RNA,定位于8q24.21,在许多肿瘤研究中,PVT1过表达已被报道,PVT1与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移密切相关,本研究采用多种技术结合研究PVT1在前列腺癌中的作用。包括生物信息学分析、Westernblotting和细胞迁移分析,我们报道PVT1通过调节上皮间质化（EMT）,促进前列腺癌的侵袭和转移,并且PVT1通过上调Twist1（一种与EMT相关的转录因子）来促进EMT,然后我们证实PVT1作为mi RNA-186-5p的海绵,并通过海绵效应对Twist1进行了正向调节。因此,本研究揭示了一种新的机制。PVT1促进前列腺癌中EMT的表达,提示PVT1/mir-186/Twist 1调节轴可能成为前列腺癌治疗的新靶点。研究方法:1.分析TCGA数据库所下载的前列腺组织以及前列腺癌基因序列中lnc RNA-PVT1的表达情况,应用real time-PCR检测前列腺细胞系WPMY-1以及前列腺癌细胞系PC-3,DU145,22RV1中lnc RNA-PVT1的表达情况;2.应用脂质体转染技术,构建高/低表达lnc RN... 

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料与方法
    2.1 数据获取以及相关试剂
        2.1.1 TCGA数据库分析
        2.1.2 细胞培养相关试剂及细胞系
        2.1.3 CCK8试剂盒相关试剂
        2.1.4 real-timePCR相关试剂及引物
        2.1.5 westernblot相关试剂
        2.1.6 westernblot相关溶液的配置
        2.1.7 transwell相关试剂
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养及细胞转染
        2.2.2 CCK8增殖实验
        2.2.3 细胞蛋白提取及定量
        2.2.4 细胞mRNA提取及定量
        2.2.5 Real-timePCR检测RNA方法
        2.2.6 westernblot
        2.2.7 transwell实验
        2.2.8 平板克隆实验
3 结果
    3.1 长链非编码RNAPVT1在前列腺癌组织中表达增高,并且高表达PVT1与患者不良预后呈正相关
    3.2 体外实验结果显示PVT1促进前列腺癌细胞系的增殖、侵袭与转移
    3.3 LncRNAPVT1在前列腺癌细胞系中通过调控Twist1诱导EMT
    3.4 PVT1通过海绵效应吸附miR-186从而促进Twist1表达
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果
致谢
个人简历



本文编号：3718368