PSMA激活PI3K/AKT通路对前列腺癌细胞增殖与凋亡及迁移能力的影响

发布时间：2023-02-14 18:17

　　【目的】利用前期研究中构建的抑制PSMA表达的慢病毒及促进PSMA表达的腺病毒感染前列腺癌LNCap细胞,探讨PSMA通过PI3K/AKT通路对前列腺癌细胞迁移及凋亡影响。【方法】实验对象包括稳定阻断PSMA表达的细胞株(干扰组),PSMA过表达的LNcap细胞株(过表达组),不作任何处理的LNcap细胞株(对照组)。在一般培养基及含有PI3K/Akt通路抑制剂(LY294002)的环境下,利用Western blot及免疫细胞化学方法观察3组细胞p-Akt的表达量,并使用CCK-8法描绘细胞生长曲线、transwell检测细胞迁移能力、流式细胞仪检测细胞凋亡。【结果】Western blot及细胞免疫化学提示抑制PSMA表达后,p-Akt表达水平下降,过表达PSMA后p-Akt表达水平提高;在LY294002抑制作用下,3组细胞p-Akt均处于较低水平,且彼此无明显差异(P>0.05)。CCK-8法显示抑制PSMA后细胞增殖能力下降,增强则升高;Transwell法显示对照组穿透细胞数为56.30,而干扰组为36.60,过表达组为67.80;流式细胞仪检测细胞凋亡率抑制组为4....

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 细胞培养
    1.3 细胞内Akt蛋白磷酸化水平检测
        1.3.1 Western blot法
        1.3.2 细胞免疫化学
    1.4 三组细胞增殖、迁移、凋亡的检测
        1.4.1 CCK-8法描绘细胞的生长曲线
        1.4.2 Transwell法评估细胞迁移能力
        1.4.3 流式细胞仪检测细胞凋亡
    1.5 统计分析
2 结果
    2.1 Akt蛋白磷酸化水平检测结果
        2.1.1 Western Blot
        2.1.2 细胞免疫化学
    2.2 细胞增殖、迁移、细胞周期的检测结果
        2.2.1 细胞生长曲线
        2.2.2 Transwell迁移实验
        2.2.3 流式细胞仪结果
3 讨论



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