LSD1介导的组蛋白H3K4去甲基化对雄激素受体调控靶基因转录的影响

发布时间：2023-02-18 22:48

　　雄激素受体(AR)是一个转录因子,它可以调控其下游靶基因的转录表达过程,并且它在前列腺癌的恶化发展过程中起着重要作用。和雄激素结合后,AR进入细胞核,和染色质上特定的DNA片段一一雄激素反应元件(ARE)结合,发挥其功能。在本论文的研究中,我们发现AR和染色质片段的结合引发了赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)介导的组蛋白3的4位赖氨酸的去甲基化过程。去甲基化过程产生了过氧化氢等活性氧组分(ROS),它是一种对细胞生理有害的物质,可以氧化DNA链上较为脆弱的鸟嘌呤成为8氧鸟嘌呤,ROS的产生引起了8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)以及脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(Ape1)等核酸修复通路酶与染色质增强子,启动子区域的结合,来消除活性氧对细胞造成的损伤,确保AR靶基因转录过程的顺利进行。在这个过程中,RNA聚合酶Ⅱ以及拓扑异构酶Ⅱ等辅助蛋白因子和AR, LSD1, Apel,OGG1一起形成转录复合物,参与转录过程。在本论文中,我们使用具有抗氧化剂活性以及氧化酶抑制剂活性的药物对前列腺癌细胞进行处理,实验证明阻碍氧化过程会使得AR靶基因：PSA, TMPRSS2, miR-125b2以及...

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略词列表
引言
第一部分 研究背景
    1.1 雄激素受体(AR)调控通路介绍
    1.2 表观遗传学修饰和AR调控通路的关系
    1.3 DNA氧化损伤/修复过程对AR调控通路的影响
    1.4 AR靶基因区域基因线环结构的形成对于转录的影响
第二部分 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 材料,酶,抗体
        2.1.2 细胞系
        2.1.3 试剂配制
        2.1.4 仪器设备
        2.1.5 引物序列和siRNA序列
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 细胞瞬时转染
        2.2.3 细胞总RNA的提取
        2.2.4 逆转录
        2.2.5 实时荧光定量PCR(qPCR)
        2.2.6 染色质免疫沉淀
        2.2.7 染色体结构捕捉(3C)
        2.2.8 Western Blot
第三部分 实验结果
    3.1 实验中涉及的AR调控靶基因基本情况
        3.1.1 PSA(前列腺特异性抗原,prostate specific antigen)
        3.1.2 TMPRSS2
        3.1.3 miR-125b2
        3.1.4 miR-133b
    3.2 AR靶基因的表达受组蛋白去甲基化以及DNA氧化损伤过程的影响
    3.3 AR调控靶基因的表达量受到LSD1,OGG1和Topoisomerase Ⅱ的表达量影响
    3.4 AR招募LSD1结合到染色体的特定位置,并形成转录复合物,引起组蛋白赖氨酸残基的去甲基化过程
    3.5 二甲基化的组蛋白H3第四位赖氨酸(H3K4me2)的去甲基化过程引发了AR调控靶基因的转录过程
    3.6 BER修复相关蛋白结合染色质相关区域并形成转录复合物,促进AR调控靶基因的表达
    3.7 AR和众多辅助蛋白因子共同形成转录复合物,促进AR调控靶基因的表达
    3.8 基因线环结构的形成促进转录复合物的形成,也就促进了AR调控靶基因的表达
第四部分 讨论
    4.1 组蛋白H3赖氨酸残基的去甲基化过程的进一步研究
    4.2 miR-125b2以及miR-133b预测的ARE靶位点的分析
    4.3 8-oxo-dG进入BER修复途径的进一步分析
    4.4 基因线环结构的形成以及它对AR调控靶基因转录的影响分析
    4.5 表观遗传学影响AR调控靶基因转录过程相关的前列腺癌治疗
    4.6 OGG1在细胞系中和癌症恶化的相关研究
参考文献
致谢



本文编号：3745698