肾小管上皮细胞FOXO1在内毒素血症急性肾损伤中的作用及机制

发布时间：2023-02-26 03:24

　　研究背景脓毒血症指由于感染及感染所致全身炎症反应导致多器官功能衰竭的一组综合征。其中革兰阴性菌内毒素-脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)是脓毒血症重要致病因素。肾小管上皮细胞线粒体结构及功能损伤是内毒素血症诱发急性肾损伤(Acute kidney injury,AKI)的关键病理改变。但是内毒素血症AKI中肾小管上皮细胞损伤机制尚不清楚。叉头框转录蛋白O1(Forkhead box O1,FOXO1)是一类保守转录因子,参与调控氧化应激、糖代谢、DNA损伤修复。FOXO1在肾实质细胞中广泛表达,在糖尿病肾病、肾纤维化等多种肾脏疾病中发挥重要作用。但在内毒素血症AKI中,肾小管上皮细胞FOXO1的作用及具体机制尚不明确。研究目的探讨肾小管上皮细胞FOXO1在内毒素血症AKI中的作用及机制。研究方法1)动物实验:6-8周C57BL/6小鼠腹腔注射LPS(10mg/kg)诱导内毒素血症AKI模型,检测血清肌酐、尿素氮、TNF-α、IL-6。利用Western blot、qPCR、免疫荧光等检测小鼠肾脏FOXO1、线粒体中枢调控分子过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活物 1-...

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
前言
    1. 脓毒血症及脓毒血症AKI的定义和流行病学
    2. 脓毒血症及脓毒血症AKI的发病机制
    3. 脓毒血症AKI的治疗现状
    4. FOXO1与肾脏疾病
第一章 实验材料与试剂
    1.1 实验动物
    1.2 实验细胞株
    1.3 实验试剂
    1.4 实验仪器
第二章 实验方法
    2.1 内毒素血症AKI小鼠模型的构建
    2.2 小鼠FOXO1过表达腺相关病毒肾脏原位注射
    2.3 小鼠肾功能的测定
    2.4 肾脏标本电镜检测
    2.5 炎症因子测定
    2.6 石蜡切片的制备及PAS染色
    2.7 条件永生化人肾小管上皮细胞的培养
    2.8 体外HK-2细胞实验分组及药物干预
    2.9 HK-2细胞siRNA转染
    2.10 HK-2细胞腺病毒转染
    2.11 Western blot
    2.12 实时荧光定量PCR
    2.13 免疫荧光染色
    2.14 Mitotracker染色
    2.15 MitoSOX染色
    2.16 MTT细胞活力测定
    2.17 统计分析
第三章 实验结果
    3.1 FOXO1在内毒素血症AKI小鼠肾小管表达下调
    3.2 过表达FOXO1对内毒素血症AKI小鼠肾功能及线粒体的影响
    3.3 FOXO1在内毒素血症肾小管上皮细胞模型中表达下调
    3.4 过表达FOXO1对内毒素血症HK-2细胞损伤的影响
    3.5 HK-2细胞内FOXO1可调控PGC1-α的表达
第四章 讨论
结论
参考文献
中英文缩略词表
成果
致谢



本文编号：3749717