类固醇受体共激活因子-3在膀胱癌中的表达及对膀胱癌增殖作用的影响

发布时间：2017-05-18 05:07

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【摘要】：目的:研究类固醇受体共激活因子-3(Steroid Receptor Coactivator-3,SRC-3)在膀胱癌中的表达及其对膀胱癌增殖作用的影响方法:实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,q RT-PCR)和western blot检测SRC-3 m RNA和蛋白在28例膀胱尿路上皮癌标本中的表达情况。构建SRC-3腺病毒过表达载体以及SRC-3小干扰RNA(small interference RNA,si RNA)转染膀胱癌EJ细胞和T24细胞。q RT-PCR检测SRC-3 m RNA过表达和沉默效果,Western blot分析过表达和沉默SRC-3后SRC-3蛋白表达水平。Brd U增殖实验检测过表达RC-3以及沉默SRC-3后,对膀胱癌EJ细胞和T24细胞增殖活性的影响。为了研究SRC-3的作用机制,在过表达和沉默SRC-3后,q RT-PCR和western blot检测CXC趋化因子受体-4(C-X-C chemokine receptor type-4,CXCR4)m RNA和蛋白表达情况。同时过表达SRC-3细胞株中转染CXCR4 si RNA沉默CXCR4基因,检测干扰CXCR4后对过表达SRC-3的膀胱癌细胞增殖活性的影响。结果:实时荧光定量PCR和western blot结果显示SRC-3 m RNA和蛋白在71.4%(20/28)的膀胱癌标本中表达上调,同癌旁正常组织相比,表达倍数变化具有统计学差异(SRC-3 m RNA,Normal vs Bladder cancer:7.1±2.3 vs 1.6±1.3,P0.01)。过表达SRC-3后,Brdu增殖实验结果示膀胱癌EJ细胞和T24细胞增殖活性显著增强,差异具有统计学意义(EJ,EV vs SRC-3:0.5±0.4 vs 0.8±0.6,P0.05;T24,EV vs SRC-3:0.6±0.2,0.8±1.0,P0.01);而si RNA干扰SRC-3表达后,EJ细胞和T24细胞增殖活性显著下降,差异具有统计学意义(EJ,control vs si RNA:0.7±0.1 vs 0.44±0.1,P0.01;T24,control vs si RNA:0.78±0.2 vs0.43±0.06,P0.01)。过表达SRC-3的膀胱癌细胞中,CXCR4 m RNA(P0.05)和蛋白表达上调;沉默SRC-3后,CXCR4 m RNA(EV vs SRC-3:1.0±0.1 vs 2.8±0.3,P0.01)和蛋白表达下调。在过表达SRC-3细胞株中转染CXCR4 si RNA后,过表达SRC-3的膀胱癌EJ细胞增殖活性显著下降(EV vs SRC-3:0.87±0.2vs 0.58±0.4,P0.05),同空白对照组相比,增殖活性无明显统计学差异。结论:SRC-3在膀胱癌中过表达,通过调节CXCR4促进膀胱癌细胞增殖。
【关键词】：类固醇受体共激活因子-3 膀胱癌 增殖 CXC趋化因子受体-4
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.14
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 序言9-12
• 参考文献10-12
• 第一部分12-33
• 引言12
• 材料与方法12-26
• 结果26-29
• 讨论29-30
• 参考文献30-33
• 第二部分33-47
• 序言33
• 材料与方法33-41
• 结果41-43
• 讨论43-44
• 参考文献44-47
• 总结与展望47-48
• 综述48-57
• 参考文献53-57
• 中英文缩写对照词表57-58
• 攻读硕士期间公开发表的论文58-59
• 致谢59-60

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本文编号：375168